工业微生物育种复习题-副本分解.docVIP

工业微生物育种知识点汇总 1.1工业微生物：包括所有工业上应用的微生物，还包括一些工业生产中必须处理的杂菌。包括细菌、放线菌、单细胞藻类、酵母菌和其他真菌，以及通过各种人工手段改建的新细胞和动、植物的细胞培养物。 组成酶是微生物细胞中经常存在的一类酶。组成酶的合成只受细胞内遗传物质的控制，与环境中的营养物质无关碱基置换DNA序列中一种碱基替换另一种碱基导致突变。包括两种类型：转换是由嘌呤置换嘌呤或嘧啶置换嘧啶。颠换是指嘌呤置换嘧啶或嘧啶置换嘌呤 ①操纵子包括三类基因：启动基因来决定RNA聚合酶的结合位点，操纵基因来调控RNA聚合酶的启动或停止，结构基因来决定蛋白质的结构。 ②调节基因用来编码阻遏蛋白。 ③三个结构基因Z，Y，A分别编码三个酶，β-半乳糖苷酶，通透酶和转酰酶。 ㈠用大肠杆菌乳糖操纵子阐明酶的诱导： 当葡萄糖存在时，调节基因编码的阻遏蛋白会和操纵基因紧密结合，挡住了RNA聚合酶的去路，转录不能启动，mRNA和酶不能合成。 当葡萄糖耗尽，只能利用乳糖cAMP（环腺苷酸与CAP分解代谢物活化蛋白结合，促使RNA聚酶与启动基因结合而开始转录。 CAP-cAMP复合物减少，不能与启动结合，故转录不得进行当葡萄糖作唯一碳源时，葡萄糖的降低了cAMP，CAP-cAMP复合物减少RNA聚酶与启动基因结合，故转录不得进行碱基置换缺失或插入②土壤酸碱度和植被状况 偏碱土壤环境，适合于细菌、放线菌生长。偏酸的土壤环境下，霉菌、酵母菌生长旺盛。植物根部的分泌物有所不同，即植被对微生物分布也有一定的影响。 ③地理条件 南方土壤比北方土壤中的微生物数量和种类都要多，特别是热带和亚热带地区的土壤。 ④ 季节条件 冬季温度低，气候干燥，微生物生长缓慢，数量最少。到了春天随着气温的升高，微生物生长旺盛，数量逐渐增加。 ㈡怎样从土壤中采样 取5—25cm处的土样10—25g，装入事先准备好的塑料袋内扎好。给塑料袋编号并记录地点、土壤质地、植被名称、时间及其他环境条件。一般样品取回后应马上分离，以免微生物死亡。或可事先用选择性培养基做好试管斜面，随身带走。将取好的土样混匀，取3—4g撒到试管斜面上。 ㈢根据微生物生理特点采样 ①根据微生物营养类型 每种微生物对碳、氮源的需求不一样，分布也有差异。微生物的营养需求和代谢类型与其生长环境有着很大的相关性。如：森林土富含纤维素—适合纤维素酶产生菌的生长 ②根据微生物的生理特性 在筛选一些具有特殊性质的微生物时，需根据该微生物独特的生理特性到相应的地点采样。如：海洋底部采样——分离耐压菌 6.2 富集培养：是在目的微生物含量较少时，根据微生物的生理特点，设计一种选择性培养基，创造有利的生长条件，使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖，数量增加，由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种，以利分离到所需要的菌株。 怎样选择和采集含微生物的样品，举例说明。 从土壤中采样 1. 土壤有机质含量和通气状况2. 土壤酸碱度和植被状况3. 地理条件4. 季节条件 二、根据微生物生理特点采样 1. 根据微生物营养类型 森林土富含纤维素—适合纤维素酶产生菌的生长；肉类加工厂附近和饭店排水沟的污水、污泥中—分离蛋白酶和脂肪酶产生菌；面粉加工厂、糕点厂、酒厂及淀粉加工厂等场所—分离产生淀粉酶、糖化酶的菌株。蜂蜜、蜜饯、甜果及含糖浓度高的植物汁液中—筛选酵母菌。柑橘、草莓及山芋等果蔬中含有较多果胶—分离果胶酶产生菌 2.根据微生物的生理特性 筛选高温酶产生菌时，通常到温度较高的南方，或温泉、火上爆发处及北方的堆肥中采样；海洋底部采样——分离耐压菌；甜果、蜜饯或甘蔗渣堆积处采样——分离耐高渗透压酵母菌。 三、特殊环境下采样 1. 局部环境条件的影响 2.极端环境条件的影响 简要说明含微生物样品的富集培养方法。 富集培养是在目的微生物含量较少时，根据微生物的生理特点，设计一种选择性培养基，创造有利的生长条件，使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖，数量增加，由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种，以利分离到所需要的菌株。 富集培养主要根据微生物的碳、氮源、pH、温度、需氧等生理因素加以控制。 一、控制培养基的营养成分 微生物的代谢类型十分丰富，其分布状态随环境条件的不同而异。 在富集培养时，还需根据微生物的不同种类选用相应的富集培养基。 二、控制培养条件 在筛选某些微生物时，除通过培养基营养成分的选择外，还可通过它们对pH、温度及通气量等其他一些条件的特殊要求加以控制培养，达到有效的分离目的。 三、抑制不需要的菌类 在分离筛选的过程中，除了通过控制营养和培养条件，增加富集微生物的数量以利于分离外，还可通过高温、高压、加入抗生素等方