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- 2017-05-12 发布于湖北
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IB部分 专题八 生物技术实践 第1讲 微生物的利用和酶的应用 一、微生物的基本技术 1.培养基的制备:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。 2.无菌技术:主要包括消毒和灭菌。 (1)消毒方法:常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。 (2)常用灭菌方法。 ①灼烧灭菌:接种环、接种针等金属器具。 ②干热灭菌:主要针对玻璃器皿等。 ③高压蒸汽灭菌:主要针对培养基等。 3.倒平板操作: 4.划线分离操作:划线分离法通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。注意划线的方法(见图)。 5.涂布分离法:先将菌液进行一系列梯度稀释后涂布平板,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散到培养基的表面,从而在培养基表面形成单个菌落。如图: 【特别提醒】 (1)制备固体培养基最后要将平板倒置,主要目的是防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。 (2)划线分离法中的“连续划线”及涂布分离法中的“系列稀释”目的是一样的,都是为了保证菌种在培养基中单个分布(划线分离法中最后一次划线的末端)。 二、土壤中分解尿素的细菌的分离 1.筛选菌体:选择以尿素为唯一氮源的选择培养基。 2.原理:能分解尿素的细菌,可以在以尿素为氮源的培养基上生长,从而将它们从土壤中分离出来。 3.实验步骤:培养基灭菌→制备细菌悬液→用涂布分离法分离细菌→培养→观察。 4.菌种鉴定:在选择培养基中加入酚红
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