第九氨基酸的代谢控制与发酵摘要.ppt

第九章氨基酸的代谢控制与发酵 目的 了解各类氨基酸的代谢调节机制,掌握氨 基酸发酵的代谢控制育种方法。 内容 各类氨基酸的代谢调节机制，各类氨基 酸发酵的代谢控制育种方法 重点 各类氨基酸发酵的代谢控制育种方法 难点 各类氨基酸发酵的代谢控制育种方法 学时 3 第一节 天冬氨酸族氨基酸的代谢控制育种 天冬氨酸族氨基酸包括天冬氨酸、赖氨酸、高丝氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸。本节主要介绍赖氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、高丝氨酸、天冬氨酸发酵。 一.天冬氨酸族氨基酸的生物合成途径及代谢调节机制 (一)天冬氨酸族氨基酸的生物合成途径 葡萄糖经糖酵解途径生成丙酮酸，丙酮酸经CO2固定反应生成四碳二羧酸，后经氨基化反应生成天冬氨酸 (二)天冬氨酸族氢基酸生物合成的代谢调节机制 1．大肠杆菌中天冬氨酸族氨基酸生物合成的调节机制 大肠杆菌中天冬氨酸族氨基酸生物合成途径的代谢调节机制较复杂。 (1) 天冬氨酸激酶有3种同功酶。天冬氨酸激酶Ⅰ受苏氨酸氨酸的反馈抑制，受苏氨酸和异亮氨酸的多价阻遏；天冬氨酸激酶Ⅱ对苏氨酸不敏感，为蛋氨酸所阻遏，但不受蛋氨酸的反馈抑制；天冬氨酸激酶Ⅲ受赖氨酸的反馈抑制与阻遏。 (2)高丝氨酸脱氢酶有2种同功酶。高丝氨酸脱氢酶I受苏氨酸的反馈抑制，受苏氨酸和异亮氨酸的多价阻遏；高丝氨酸脱氢酶Ⅱ对苏氨酸不敏感，受蛋氨酸的反馈阻遏。 (3)二氢吡啶—2，6—二羧酸还原酶受赖氨酸的反馈抑制。 (4)O—琥珀酰高丝氨酸转琥珀酰酶和半胱氨酸脱硫化氢酶受蛋氨酸的反馈阻遏。 (5)高丝氨酸激酶受苏氨酸的反馈阻遏。 (6)苏氨酸脱氨酶受异亮氨酸的反馈抑制。 2．谷氨酸棒杆菌、黄色短杆菌等中的天冬氨酸族氨基酸的代谢调节机制 (1)关键酶 天冬氨酸激酶是关键酶，受赖氨酸和苏氨酸的协同反馈抑制。 (2)优先合成 蛋氨酸比苏氨酸、赖氨酸优先合成，苏氨酸比赖氨酸优先合成。 (3)代谢互锁 在乳糖发酵短杆菌中，赖氨酸分支途径的初始酶二氢吡啶—2，6—二羧酸合成酶受亮氨酸的反馈阻遏。 (4)平衡合成 天冬氨酸和乙酰CoA形成平衡合成。当乙酰CoA合成过量时，能解除天冬氨酸对磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的反馈抑制。 (5)天冬氨酸与谷氨酸之间的调节机制 谷氨酸比天冬氨酸优先合成。当谷氨酸合成过量时，反馈抑制谷氨酸脱氢酶，使生物合成转向合成天冬氨酸。当天冬氨酸合成过量时,反馈抑制磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶，使整个生物合成停止。 二、赖氨酸发酵 1、赖氨酸发酵代谢调节机制 2、赖氨酸发酵菌种选育 （1）切断或减弱支路代谢 （2）解除反馈调节 （3）解除代谢互锁 （4）改善膜的通透性 （5）增加前体物的合成 （6）选育温度敏感突变株 （7）选育脲酶回复突变株 （8）利用基因工程技术构建赖氨酸工程菌株 三、苏氨酸发酵 (一)苏氨酸高产茵应具备的生化特征 (1)二氧化碳固定反应能力强。 (2)天冬氨酸合成能力强。 (3) 天冬氨酸激酶活力强。 (4)高丝氨酸脱氢酶活力强。 (5)二氢吡啶—2，6—二羧酸合成酶活力微弱或丧失。 (6)琥珀酰高丝氨酸转琥珀酰酶活力微弱或丧失。 (7)谷氨酸脱氢酶活力弱。 (8)苏氨酸脱氨团活力微弱或丧失。 (二)选育苏氨酸生产菌的方法 （1）切断支路代谢 （2）解除反馈调节 （3）增加前体物天冬氨酸的合成 （4）切断苏氨酸进一步代谢途径 （5）利用现代生物技术选育苏氨酸生产菌株 四、蛋氨酸发酵 (一)蛋氨酸高产菌应具备的生化特征 (1)二氧化碳固定反应能力强。 (2)天冬氨酸合成能力强。 (3) 天冬氨酸激酶活力强。 (4)高丝氨酸脱氢酶活力强。 (5)二氢吡啶—2，6—二羧酸合成酶活力微弱或丧失。 (6)O-琥珀酰高丝氨酸转琥珀酰酶活力强。 (7)谷氨酸脱氢酶活力弱。 (8)高丝氨酸激酶活力微弱或丧失。 (9)S-腺 苷蛋氨酸合成酶丧失 (二)蛋氨酸高产菌定向育种方法 （1）解除反馈调节 （2）切断支路代谢 （3）切断蛋氨酸向下反应的通路 （4）增加前体物天冬氨酸的合成 五、高丝氨酸 发酵 (一)高丝氨酸高产菌应具备的生化特征 (1)二氧化碳固定反应能力强。 (2)天冬氨酸合成能力强。 (3) 天冬氨酸激酶活力强。 (4)高丝氨酸脱氢酶活力强。 (5)二氢吡啶—2，6—二羧酸合成酶活力微弱或丧失。 (6)高丝氨酸-转乙酰酶活力丧失。 (7)高丝氨酸激酶活力丧失。 (8)谷氨酸脱氢酶活力弱。 (二)高丝氨酸高产菌定向育种方法 （1）切断支路代谢 （2）解除反馈调节 （3）切断高丝氨酸向下反应的通路 （4）增加前体物天冬氨酸的合成 六、天冬氨酸发酵 (一)天冬氨酸高产菌应具备的生化特征 (1)天冬氨酸激酶丧失。