细胞培养及材料细胞毒性检测详细分析.pptVIP

物 品 湿 热 干 热 过 滤 紫 外 化学 气体 消毒剂 电离 辐射 培养室 工作台 ＋ ＋ ＋ 玻璃 制品 ＋ ＋ ＋ 金属 器械 ＋ ＋ ＋ ＋ 塑料 制品 ＋ ＋ ＋ 橡胶 制品 ＋ ＋ ＋ ＋ 培养 用液 ＋ ＋ 布类 棉类 ＋ ＋ 贴附生长型细胞 必须贴附于底物才能生长的细胞。从形态上大体分为上皮细胞型及成纤维细胞型，还有一些难以确定其稳定形态的细胞。 4.细胞培养的基本方法 粘着、粘附 （attachment） 铺展 （spreading) 1）取材 → 切割 组织块培养法 消化培养法 2）直接购买 → 培养 （原代培养） 传代 体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。 培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养。 弃去旧培养液 → 清洗 → 加入消化液 → 吸弃消化液 →加入培养液 → 吹打分散细胞 → 分装稀释细胞 → 补加培养液 → 继续培养 接种数量为5×104～8×105个/ml。 传代密度太低，细胞容易死亡，表现出细胞在达到增长前有较长的滞留期。 培养液由于pH下降而呈现黄色，表明细胞已经达到最大密度需要换液或进行传代培