细胞工程学第5详细分析
大微囊: 细胞生长慢且分泌产物少。当PLL/ALG微囊的直径超过500μm时,细胞的增殖便受到明显的抑制。 综合因素: 微囊大,容易制备;微囊小,制备困难。微囊的直径控制在200~400μm较为适宜。 固体基质微载体培养动物细胞存在 两个缺点: (1)大多数通用的微载体基质能牢固的吸附培养基中的血清,致使微载体变性,很难处理使其恢复,故只能一次性使用,因而产品的成本高。 (2)需要胰蛋白酶消化细胞/微载体,这一过程往往有大量的细胞损失掉,有时能高达20%。 Charies等人研制开发了液膜微载体新工艺,将氟碳化合物液体与接种细胞培养基在乳化状态下搅拌混合,氟碳化合物即分散形成100-500μm微液珠,动物细胞即贴附于微液珠表面生长和扩展。 当停止搅拌时,将混合物离心分相,培养的细胞游离地悬浮在轻相(有机相)和重相(培养基相)之间,有明晰的界面,用移液管即可方便地移出。这一工艺革除了胰蛋白酶消化程序,氟碳化合物经洗涤处理后又可重复使用。 五、研发国产微载体的必要性 我国微载体系统大规模动物细胞培养起步较晚,微载体市场又为国外商品所垄断。 研制开发国产微载体并实现系列化,满足国内对病毒疫苗等高疗效药物和诊断试剂的迫切需要是非常必要的。 微载体是一种价格昂贵的细胞培养专用介质,其销售价仍呈上涨趋势。 大部分微载体只能使用一次,而国产微载体价格则
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