[生化]蛋白质的结构与功能调研报告.ppt

* * * * * * * * * 免疫沉淀法:将某一纯化蛋白质免疫动物可获得抗该蛋白的特异抗体。利用特异抗体识别相应的抗原蛋白,并形成抗原抗体复合物的性质,可从蛋白质混合溶液中分离获得抗原蛋白。 三、利用荷电性质可用电泳法将蛋白质分离 蛋白质在高于或低于其pI的溶液中为带电的颗粒,在电场中能向正极或负极移动。这种通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术, 称为电泳(electrophoresis) 。 根据支撑物的不同,可分为薄膜电泳、凝胶电泳等。 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于蛋白质分子量的测定。 等电聚焦电泳,通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。 双向凝胶电泳是蛋白质组学研究的重要技术。 几种重要的蛋白质电泳: SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS) SDS(十二烷基硫酸钠)是一种阴离子去污剂,带有很多负电荷,与蛋白质结合以后,蛋白质分子带有足够的负电荷,远远超过了蛋白质分子原有的电荷,蛋白质分子原有的电荷就变得无足轻重了,所以在电场上移动的速度完全取决于蛋白质分子的大小。 SDS可将蛋白质解离成亚基,所以测出的分子量是亚基的分子量。 四、应用相分配或亲和原理可将蛋白质进行层析分离 待分离蛋白质溶液(流动相)经过一个固态物质(固定相)时,根据溶液中待分离的蛋白质颗粒大小、电荷多少及亲和力等,使待分离的蛋白质组分在两相

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