5 PCR的技术原理.ppt

第五章 PCR的技术原理教学目的和要求:通过本章的学习，要求学生了解利用 PCR 技术原理所衍生出来的技术方法的种类和工作原理，达到能够自觉合理地利用 PCR 技术为科研服务，PCR 鉴定和诊断；理解PCR介导的克隆和PCR介导的诱变；掌握PCR 技术的基本原理、基本操作程序，引物设计方法。重点、难点： PCR 技术的基本原理；引物设计方法；PCR介导的克隆。教学方法：讲授、讨论、计算机辅助教学等 本章思考题：1.简述PCR反应的工作原理。2.循环次数是否越多越好？为何？3. 进行PCR引物设计时应注意哪些原则?4.进行PCR产物克隆的方法主要有哪些？主要参考资料:1.吴乃虎主编. 基因工程原理(第二版) .北京:科学出版社,2002.2. J.萨姆布鲁克等.分子克隆实验指南(第三版).北京:科学出版社, 2002. 3. F. 奥斯伯等著.精编分子生物学实验指南.北京:科学出版社, 2005. 4. [美] 本杰明?卢因编著.基因Ⅷ.北京:科学出版社,2007.5.何光源主编.植物基因工程实验手册.北京:清华大学出版社,2007 第一节 PCR技术原理和工作方式 1983年，由Cetus 公司的Kary Mullis 建立； 1988年耐热的Taq DNA聚合酶被发现和应用，把PCR推向了实用阶段，成