高效液相色谱培训(HPLC使用与维护)汇总.pptxVIP

HPLC的使用与维护;基本原理和特点 液相色谱仪器部件 实验操作与应用 日常维护 ;基本原理和特点;一些商品化仪器;启动液相色谱仪器的流程 ;高效液相色谱仪组成;;液相色谱的流动相;液相柱---保留值与pH的关系;2. 流动相类别;对溶剂的要求;不管采用何种途径，配制流动相应用新鲜水，水质要求越高放置时间越短。 理想的HPLC用水应为18.2Ω的超纯水，并通过0.22um的滤膜，除去热源、有机物、无机离子及空气等。 ;过滤：0.45um或更小孔径滤膜 目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是使用无机盐配制的缓冲液。 脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响： 1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形 3）检测器中的气泡产生基线波动 ;流动相的保存;1．梯度洗脱的特点;2．梯度洗脱的主要条件;梯度洗脱;梯度：低压混合;梯度滞后：系统体积的影响;梯度滞后大小的影响;滞后体积变化的影响;;色谱柱的连接 ;锥箍锥度不合适造成渗漏 ;除去柱上端固定相变色部分 (约3mm左右)，再补充新的固定相。 色谱柱吸附未被洗脱成分时，柱效将明显下降，选合适的溶剂进行洗净。 采用梯度洗脱时，柱在重复使用前，用泵把几倍于柱体积的起始溶剂压经柱子，以重新建立起始的平衡来得到再生。