呈色反应及等电点测定研讨.ppt

生物化学实验 蛋白质及氨基酸的呈色反应 蛋白质等电点的测定 蛋白质及氨基酸的呈色反应 1.学习蛋白质的鉴定方法并了解其原理; 2.学习氨基酸的鉴定方法并了解其原理. 实验内容 双缩脲反应（尿素和蛋白液） 黄色反应（头发，指甲，蛋白液） 茚三酮反应（氨基酸，蛋白质） 原理 原理 实验内容 1.加热尿素生成双缩脲,观察双缩脲反应的颜色变化; 2.观察透析蛋白液的双缩脲反应的颜色变化. 实验试剂 尿素(晶体) 10%氢氧化钠溶液 1%硫酸铜溶液 蛋白液（取鸡蛋清，加6-10倍水混匀，过滤） 实验器材 试管及试管架 试管夹 酒精灯 实验操作 见教材 注意事项 选用干燥的试管,尿素加热时间不能过长(1分钟以内); 避免加入过量CuSO4 ,否则生成兰色的Cu(OH)2能掩盖紫红色. 黄色反应 实验试剂与器材 见教材 实验操作 见教材 原理 实验内容 1.蛋白质(蛋白液)的茚三酮反应; 2.氨基酸的茚三酮反应. 实验试剂 0.5%茚三酮乙醇溶液 透析蛋白液 0.5%甘氨酸溶液 实验器材 试管 试管架 酒精灯 电吹风 注意事项 在滤纸上观察茚三酮反应时,滤纸应该跟火焰保持一定距离. 思考题 1.如果蛋白质水解作用一直进行到双缩脲反应呈阴性结果,可对水解作用作出什么结论? 2.能否利用茚三酮反应可靠的鉴定蛋白质的存在? 蛋白质含量测