乙型肝炎肝硬化患者FoxP3+mRNA表达与血清IL-12、+IL-18水平的变化.pdf

摘 要 目的：慢性乙型肝炎病毒感染的发病机制与机体免疫反应关系密切，近 年来关于 CD4+CD25+Treg 细胞在 HBV 感染者中的功能和作用，日益成为研 究的焦点。明确Treg 细胞对效应 T 细胞及相关细胞因子的免疫耐受状态的 调控机理，对于有效终止病毒持续感染具有重要意义。FoxP3 是目前公认 的 CD4+CD25+Treg 细胞的最具特异性的转录因子，通过检测 FoxP3 mRNA 的表达情况，可准确反映 CD4+CD25+Treg 细胞的活性水平。本实验旨在初 步探讨慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者 FoxP3 mRNA 表达及血清中 IL-12、IL-18 水平变化及其意义，并分析外周血 FoxP3 mRNA 表达与血清 IL-12、IL-18 水平的相关关系，以及外周血 FoxP3 mRNA 表达、血清 IL-12、 IL-18 水平与病毒载量的相关关系。方法：1.提取健康对照组、慢性乙型肝 炎组、乙型肝炎肝硬化组新鲜血液中的总RNA ，逆转录成 cDNA ；实时荧 光定量 PCR （Real-Time PCR ）扩增检测健康对照组、慢性乙型肝炎组、乙 型肝炎肝硬化组 FoxP3 mRNA 的表达水平，并分析外周血 FoxP3 mRNA 表 达与病毒载量的相关关系。2.采用 ELISA 方法测定健康对照组、慢性乙 型肝炎组、乙型肝炎肝硬化组血清的 IL-12、IL-18 水平，并分析血清 IL-12 、 IL-18 水平与病毒载量的相关关系。3.分析健康对照组、慢性乙型肝炎组、 乙型肝炎肝硬化组三组研究对象 FoxP3 mRNA 表达及 IL-12 、 IL-18 水平 的变化及其相关关系。4 .分别测定并分析健康对照组、慢性乙型肝炎组、 乙型肝炎肝炎肝硬化组的血清学指标，包括 ALT 、AST 、ALB 、PTA 、HBsAg 、 1 HBsAb 、HBeAg 、HBeAb 、HBcAb 、HBV-DNA 定量。结果：1.慢性乙型 肝炎、乙型肝炎肝硬化组的 FoxP3 mRNA 表达及 IL-12、 IL-18 水平，和 正常健康组比较明显升高，差异有统计学意义 （P0.05 ）；2.进一步两两 比较：健康对照组与乙型肝炎肝硬化组、健康对照组与慢性乙型肝炎组组 间FoxP3 的Mann-Whitney U 值为 0.000，两组间有统计学差异 （p=0.000 ， P0.05 ）；慢性乙型肝炎与乙型肝炎肝硬化组组间：Mann-Whitney U 值为 225.500 ，两组间无统计学差异 （p=0.189 ，p0.05 ）；健康对照组与乙型肝 炎肝硬化组 IL-12 的 Mann-Whitney U 值为 24.000 ，差异有统计学差异 （p=0.000，p ＜0.05 ）；健康对照组与慢性乙型肝炎组 Mann-Whitney U 值 为 12.000，（ p=0.000，p ＜0.05 ）组间有统计学差异；慢性乙型肝炎与乙 型肝炎肝硬化组间：Mann-Whitney U 值为 264.000 ，两组无统计学差异 （p=0.597 ，p0.05 ）；健康对照组与 乙型肝炎肝硬化组 IL-18 的 Mann-Whitney U 值为 7.000，组间有统计学差异 （p=0.000，p ＜0.05 ）； 健康对照组与慢性乙型肝炎组：Mann-Whitney U 值为 36.000 ，组间有统 计学意义 （p=0.025 ，p ＜0.05 ）；慢性乙型肝炎与乙型肝炎肝硬化组： Mann-Whitney U 值为 223.000 ，两组无统计学差异 （p=0.173，p0.05 ）。 3.采用 Spearman 相关系数方法对慢性乙型肝炎感染者 FoxP3 mRNA 与 IL-12、IL-18 水平作相关性分析，FoxP3