LC-MS基础1.ppt

液质联用技术简介Introduction in the Application of Liquid Chromatography－ Mass Spectrometry s1020429 张晶晶 s1020432 焦广睿 液质联用技术简介 图解 液质联用与气质联用的区别 气质联用仪(GC-MS)是最早商品化的联用仪器，它的优点受到广泛承认。在物质分离、定性这方面GC-MS 是有效的手段，但是，可分析的试样只限分析小分子、易 挥发、热稳定高、能气化的化合物；用电子轰击方式（EI）得到的谱图， 可与标准谱库对比。 也就是说LC-MS 具有分析试样的适用范围广的优点。 液质联用(LC-MS)主要可解决如下几方面的问题： 不挥发性化合物分 析测定； 极性化合物的分析测定； 热不稳定化合物的分析测定； 大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析测定； 没有商品化 的谱库可对比查询，只能自己建库或自己解析谱图。 LC-MS 的装置构成 质谱仪是由导入试样的HPLC 单元、LC与MS 的接口部分、试样离子化效导入生成离子的静电透镜部、将离子按质荷比m/z 分离的质谱分析部和检测被分离的离子的检测部构成。 根据离子化的不同有各种不同种类，这里展示采用一般LC-MS 检测器的大气压离子化四极杆MS 的构成（图2）。在大气压离子化部分包括电喷雾离子源（ESI）、大气压化学离子（APCI）等，起到与HPLC 接口和离子源的作用。这里产生的离子，脱溶剂后通过八极杆等聚焦，导入四极杆。在四极杆上加直流与高频交流电压，只让具有目标m/z 的离子通过。将到达检测器的离子流转化成信号，在PC 上读取。 进行MS/MS的仪器从原理上分为两类 仪器和工作原理简介 LC系统 接口和离子化方式 质量分析器 仪器的基本功能 离子极化方式 碰撞诱导裂解（CID） 扫描类型和扫描方式? LC-MS仪器组成框架图 ?真空系统 样品 液相色谱仪 接口 质量分析器 数据处理 LC系统  与传统的LC系统组成相同检测器 UV MS 色谱泵能在低流速下，提供流量准确、稳定的流动相 流动相不能含非挥发性盐类（如磷酸缓冲盐和离子对试剂） 流动相低浓度电解液和高比例有机相易获高离子化效率 接口和离子化方式 接口的作用 将流动相及其样品气化 分离出去大量的流动相分子 完成样品分子的电离 接口和离子化方式 接口的类型 传送带接口（MB） 粒子束接口（PB） 直接导入接口（DLI） 连续流动快原子轰击（CFFAB） 热喷雾接口（TSP） 大气压离子化接口（API） ） 大气压离子化接口（API） （1）电喷雾电离（ ESI） （2）大气压化学离子化（ APCI） ） （1）电喷雾电离（EPI） 流出液在高电场下形成带电喷雾，在电场力作用下穿过气帘； 气帘的作用：雾化；蒸发溶剂；阻止中性溶剂分子 特点 ： 通常小分子得到[M+H]+ 、[M+Na]+ 或[M-H]-单电荷离子测定混合物；最软的电离技术，通常只产生分子离子峰； 生物大分子产生多电荷离子，其易形成多电荷离子的特性可分析蛋白质和DNA等生物大分子； 通过调节离子源电压控制离子的碎裂（源内CID） 测定化合物结构。 大气压化学离子化（APCI） 样品液从由具有雾化气套管的毛细管端流出，经氮气流雾化， 通过加热管被气化 后经电晕尖端放电，溶剂分子被电离形成溶剂离子，然后雾化气和这些溶剂分子与气态样品分子反应，得到样品分子的准分子离子 特点 通常用于分析有一定挥发性的中等极性和弱极性 小分子化合物分析； 相较EPI对溶剂、流速和添加物的依赖性小； 适应高流量的梯度洗脱或高低水溶液变化的流动相； 通过调节离子源电压控制离子的碎裂（源内CID）测定化合物结构。 质量分析器 双聚焦扇形磁场-电场串联仪器(sector). 四极质谱仪(Q). 离子阱质谱仪（TRAP） 飞行时间质谱仪(TOF). (TOF) 傅里叶变换-离子回旋共振质谱仪(FT-ICRMS). ┏四极+TOF（Q-TOF） 串列式多级质谱仪┫三重四极（QqQ） (MS/MS) ┗TOF+TOF 质量分析器 .四极杆质量分离器 质量分析器 1.四极杆质量分离器由四根平行的圆柱形电极组成，电极分两组，分别加上直流电和具有一定振幅和频率的交流电。当来自离子源的样品离子沿电极间轴向进入电场后，会在极性相反的电极间产生振荡。电极间轴向进入电场后，会在极性相反的电极间产生振荡。给定电压条件下，只有没m/z在某范围的离子沿间轴线做有限振幅的稳定的振荡运动 LC-M