酶定向进化的应用解释.pptxVIP

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酶定向进化的应用 一.酶定向进化的特点 适应面广;目的性强;效果显著 二.酶定向进化的应用 提高酶的催化效率 增加酶的稳定性 改变酶的底物特异性 改变对应体特异性 适应特定催化环境的能力 创造新的酶活性 一.酶定向进化的特点 1.适应面广 定点突变:需要事先知道酶的结构,功能或结构与功能之间的关系 定向进化:不需要知道这些信息,所以可以广泛的应用于各类酶的改造 2.目的性强 定向进化:随机突变+定向选择 定向选择时,可以人为控制特殊的环境条件,进化方向明确 3.效果显著 自然进化:几万年~几百万年 定向进化:几天~几年 一.提高酶的催化效率 可以显著提高酶的催化效率,是定向进化的主要目标之一 例如: 1994年斯田沫等通过DNA重排技术进行定向进化,使Bate-内酰胺酶催化活性提高32000倍 1993年陈等人提高枯草杆菌蛋白酶E在有机溶剂中的催化效率(157倍) 提高酶的稳定性 提高酶稳定性的方法: 分子修饰 固定化 非水相介质催化 定向进化 三.改变酶的底物特异性 底物特异性是酶催化的最重要特性,通过酶定向进化可以改变酶催化作用的底物特异性,使酶对某种底物的特异性提高或降低,甚至呈现出另一种酶的催化活性。 例如: 2000年,阿哈若尼将大肠杆菌碱性磷酸酶对有机磷酸脂的特异性提高2000倍 四.改变对应体特异性 手性药物合成; 例如:Arnold使倾向于催化D型底物的乙内酰脲酶变成倾向于L型底物 五.适应特定催化环境的能力 例1:枯草杆菌蛋白酶E在有机溶剂中的催化效率 ;例2:酶应用到洗涤剂工业,在存在螯合剂的环境中起作用。可通过定向进化改变金属酶对金属离子的依赖性。 谢谢!

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