酶组织化学应用总结.pptVIP

小鼠腹腔巨噬细胞-过氧化物酶 *400 白血病涂片-过氧化物酶 X400 * 酶组织化学 ---水解酶及氧化还原酶 组织化学原理及方法 显示酶的组织化学方法 1.金属沉淀法：磷酸酶的显示 甘油磷酸钠 磷酸酯+铅 磷酸铅 硫化铅 2.偶氮偶联法：显示各种酶类最重要的方法 3.电子传递法：氧化酶和脱氢酶的显示 酸性磷酸酶 底物 酶 初级反应产物（PRP） 重氮盐 最终反应产物（FRP） 水解酶---这是一类增加或去除水，催化水解反应的酶 AB+H2O AH+BOH （一）碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP） 又称碱性磷酸单酯酶（EC3.1.3.1） 在碱性环境下催化多种醇和酚的磷酸酯水解 最适PH 9.2~9.4 激活剂: 如Mg++, Mn++, 某些氨基酸等 抑制剂: 氰化物、砷酸盐等 分布：广泛存在于机体组织，常见于具有活跃转运功 能的细胞膜内，如毛细血管及毛细血管动脉部分的内皮细胞，肾近曲小管刷状缘和肠上皮纹状缘 应用：1. 肝脏病、白血病的研究诊断 2. 骨的发生和代谢疾病的研究中 显示碱性磷酸酶的常用方法: 1. 钙钴法 Gomori-Takamatsu法 【基本原理】 甘油磷酸钠 磷酸酯+Ca++ 磷酸钙 磷酸钴 硫化钴 【孵育液】2%巴比妥钠, 3%β-甘油磷酸钠, 2%无水氯化钙, 5%硫酸镁 【操作步骤】