第3章_转录及其调控(药学本科)-2012资料.ppt

* * 2、mRNA5‘端加帽子和3’加尾巴 帽子结构的意义： 可以使mRNA免遭核酸酶的攻击； 也能与帽结合蛋白质复合体(cap-binding complex of protein)结合，并参与mRNA和核糖体的结合，启动蛋白质的生物合成。 3’端加多聚腺苷酸尾 poly A的有无与长短，是维持mRNA作为翻译模板的活性，以及增加mRNA本身稳定性的因素。 一般真核生物在胞浆内出现的mRNA，其poly A长度为100至200个核苷酸之间，也有少数例外。 （二）真核生物tRNA的成熟 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA RNAaseP、内切酶 tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ATP ADP 碱基修饰 （3）核苷内的转位反应 （2）还原反应 如：U ? DHU 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 原核前体RNA的加工 转录得到的只是RNA的初级产物，通常要经过加工，才能转变为成熟的RNA。tRNA 和rRNA的转录后加工比较简单。 （三）真核生物rRNA的成熟 转录 45S - rRNA 剪接 18S - rRNA 5.8S和28S-rRNA rDNA 内含子 内含子 28S 5.8S 18S 在哺乳动物细胞的核仁内，三种rRNA的合成过程均先形成45S的共同前体。然后，该前体再断裂成相应的rRNA 。 真核生物RNA修饰 rRNA前体的加工是由多亚基的核蛋白复合物来完成的。真核细胞的5S RNA基因与其它rRNA基因相分开。 转录后经过适当的加工，28S、5.8S与相关的蛋白质一起组成核糖体的大亚基。18S则是小亚基的成分。rRNA的成熟过程中也包括碱基的甲基化修饰和部分核糖的2’-OH甲基化反应。甲基的供体是S-腺苷蛋氨酸。 rRNA的加工过程 rRNA的初级转录物是45S 前rRNA, 经过一系列剪接、修饰，最后成为三种rRNA 原核生物RNA修饰 原核生物RNA转录与翻译过程是偶联的。即mRNA在转录过程中即进行翻译。原核生物mRNA初级转录物没有内含子，故没有剪接过程。核糖体RNA转录时即刻被剪切成23S及16S rRNA。tRNA也进行一些剪接及修饰。 原核 rRNA的加工 rRNA 的加工 ? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 （四）RNA的编辑(RNA editing) 人类apo B基因 mRNA（14500个核苷酸） 肝脏 apo B100 （分子量为500 000） 肠道细胞 apo B48 （分子量为240 000） mRNA编辑 载脂蛋白B mRNA 的编辑加工 组织 靶标RNA 所改变的碱基 结果 肝脏、肠 载脂蛋白B C-U 谷氨酰胺密码子-终止子 肌肉 半乳糖苷酶 U-A 苯丙氨酸密码子-酪氨酸 睾丸、肿瘤等 wilms肿瘤基因-1 U-C 亮氨酸密码子- 脯氨酸 脑 谷氨酸受体蛋白 A-I 多个谷氨酸密码子-精氨酸 RNA的编辑：包括U的插入和删除，C、A和G的插入，C被U取代或U被C取代，A转变为I等。 RNA的编辑的生物学意义 消除移码突变等过程带来的危害，甚至某些基因在突变过程中丢失达一半以上的遗传信息都可籍gRNA（guide RNA）加以补足； RNA编辑能增加基因产物的多样性，由同一基因转录物经编辑可表达出多种同源体蛋白质； RNA编辑与生物细胞的发育和分化有关，是基因调控的一种重要形式； RNA编辑使基因产物获得新的结构和功能，有利于生物进化。 mRNA的加工过程示意图 内含子的几种类型 Ⅰ 主要存在于线粒体、叶绿体及某些低等真核生物的rRNA Ⅱ 发现于线粒体、叶绿体的mRNA基因 Ⅲ 常见的形成套索后剪接的内含子，见于大多数的mRNA基因 Ⅳ tRNA的基因及其初级转录产物中的内含子 真核生物内含子碱基序列的共同特点是开始于GU，结束于AG，分别称5’剪接供体和3’剪接受体。位于3’剪接部位上游20-50个碱基处有分支点A。hnRNA中的内含子称为剪接体内含子，这些内含子的切除是由称作剪接体（spliceosome）的蛋白复合物催化的。 snRNP是一种特异的RNA-蛋白质复合体，含有多种小核RNA（small nuclear RNA, snRNA）。snRNA的长度约100-200个核苷酸。各种snRNA因富含尿嘧啶（U）而被命名为U1、U2、U4、U5、U6等。snRNA参与剪接。剪切后的几个外显子片段拼接起来形成一个完整的mRNA(图12-9，12-10)。切除的内含子很快