第二章微生物在药物开发中的应用资料.pptVIP

本章主要内容 一、微生物药物的基本概念 二、微生物药物的来源与筛选 三、微生物药物的生物合成 四、微生物药物的发酵生产 五、新微生物药物的研究进展 一、微生物药物的定义 微生物药物的定义应该是：由微生物在其生命活动过程中产生的具有生理活性(或称药理活性)的次级代谢产物及其衍生物。 这些具有生理活性的次级代谢产物包括：具有抗微生物感染和抗肿瘤作用的传统的抗生素以及特异性酶抑制剂、免疫调节剂、受体拮抗剂、抗氧化剂等。 三、寻找微生物药物基本途径和方法 1.微生物药物的筛选所涉及的理论知识 2.寻找新的微生物药物的方法 扩大微生物来源 微生物遗传性状的改变 已知微生物药物结构的改造 新技术和新方法的使用 3.当前寻找新微生物药物的热点 建立新的筛选模型，寻找非抗生素类生理活性物质。 利用基因工程技术构建能产生新的次级代谢产物的基因工程菌。 扩大微生物来源，寻找新的生理活性物质。 应用定向生物合成和突变生物合成的原理来寻找新的次级代谢产物。 对已加化合物进行化学改造来寻找效果更好的生理活性物质。 一、微生物药物产生菌 1.放线菌：应用于临床的微生物药物中，大部分来源于放线菌；在放线菌来源的微生物药物中主要是抗生素、其次是抗肿瘤药物。 —β-内酰胺类抗生素 —氨基糖苷类抗生素 —四环素类抗生素 —大环内酯类抗生素 —紫霉素类抗生素（链霉菌属、链轮丝菌属） —糖肽类抗生素（如：东方拟无枝酸菌的万古霉素） —其他细菌抗生素（利福霉素、氯霉素、新生霉素、磷霉素、环丝氨酸等 —多烯类抗生素（主要产生菌为链霉菌） —蒽环类抗生素（主要产生菌为链霉菌如阿霉素、阿克拉霉素） —糖肽类抗生素（主要产生菌为链轮丝菌，如博来霉素） —色霉素类抗生素（主要产生菌为链霉菌，如色霉素A、光神霉素） —烯二炔类抗生素（主要产生菌为链霉菌，如制癌酶素 —丝裂烷类抗生素（主要产生菌为链霉菌，如丝裂霉素） —其他如：放线菌素D、链黑霉素。 2.细菌：能产有临床应用价值的 抗生素的细菌不多，其中除了一株环状芽孢杆菌产氨基糖苷类丁苷菌素（butirosin）外，其他的菌株产生的抗生素都是多肽。 杆菌肽（枯草芽孢杆菌、地衣型芽孢杆菌等） 黏菌素、多黏菌素（多黏芽孢杆菌） 硝吡咯菌素（吡咯假单孢菌） 3.真菌 抗菌药物产生菌： 青霉素（青霉菌） 头孢霉素（头孢霉） 灰黄霉素（青霉菌） 其他药物产生菌 环孢霉素（环11肽，具有抗真菌活性，产生菌为白僵菌、镰刀霉等） 洛伐他汀（产生菌为曲霉，抑制固醇合成，是一种酶抑制剂） 二、寻找新微生物药物的途径 1.扩大微生物的来源 2.利用微生物药物的合成原理 3.利用基因工程技术开发新的微生物药物 4.利用已知微生物药物的化学修饰 5.利用沉默基因的激活产生新的微生物药物 6.微生物来源的免疫调节剂的筛选 7.微生物来源的酶抑制剂的筛选 8.微生物来源的受体拮抗剂的筛选 9.微生物来源的其它生理活性物质 1.扩大微生物的来源 （1）稀有放线菌（rare actinomycetes） 即所谓稀有放线菌即是除链霉菌外其他属的放线菌。 根据Lechevaliev研究，从土壤中分离的放线菌有95%以上是链霉菌，其次是洛卡氏菌(2%)和小单孢菌(1.4%)，其他属的放线菌含量都不足1%。 稀有放线菌的筛选方法 A.干热处理法 将采集的土样在室温下风干，研磨过筛，在微波炉中100-120℃处理1小时，分离培养（培养时间一般较长）。 B.化学药品处理法 稀有放线菌的理化性质一般不同于链霉菌，所以在分离培养基中添加不同的化学药品，有助于某些属的稀有放线菌形成优势菌落。 C.从植物中分离放线菌 连续稀释法 —直接分离法 —表面灭菌法 （2）从海洋微生物中寻找生理活性物质 新的环境下微生物极可能产生新的微生物药物 变换新的培养方法提高新药的发现机率。 更灵敏的检测手段有利于发现新的药物 新的微生物样品采集方法的使用 在不减压的条件下分离培养微生物发现新的药物 2. 利用微生物药物的合成原理 （1）定向生物合成 在发酵过程中通过添加某种特定的前体物质(如苯乙酸或苯乙酰胺及苯氧乙酸等)使微生物的生物合成朝着将这些前体物质掺入到抗生素等生物活性分子的某一特定部位而产生过量的含有这种前体的微生物药物的方法，即称为定向生物合成。 其基本原理是由于参与这些反应的生物合成酶的底物专一性较差，而能使外源添加的某些前体物质竞争性地掺入到抗生素分子中去。 例1：青霉素的生产： 青霉素合成的能力取决于侧链合成，它是青霉素合成的限速步骤。 在发酵培养基中加入玉米浆可使青霉素的产量提高了5倍，原因是玉米浆中有苯乙酰胺。 加入不同的侧链前体能合成一系列结构的青霉素。如加苯乙酰胺合成青霉素G，加入苯氧乙酸来生产青霉素V。 因此可以利用青