轮藻提取物抑菌作用研究分析.docVIP

轮藻提取物抑菌作用研究 学生：王琪 指导教师：谢树莲 李砧 摘要 以轮藻的乙醇提取液作为抑菌剂进行抑菌试验。结果表明不连续轮藻（娘子关）的醇提液对菌无抑制作用；拟丽藻普生轮藻的醇提液对大肠杆菌无抑制作用，对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌抑制作用，对金黄色葡萄球菌的抑制作用存在显著的种间和地域差异拟丽藻（晋祠）最低抑菌浓度分别为：拟丽藻（晋祠）和普生轮藻（晋祠）的醇提液对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度均为生药浓度；拟丽藻（晋祠）醇提液对枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度为生药浓度，普生轮藻（晋祠）的醇提液对枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度大于生药浓度。分1纲、3目（直立轮藻目、右旋轮藻目、左旋轮藻目），现存仅左旋轮藻目的轮藻科，含6属，约400种中国在各种淡水及半咸水中都能见到，1材料与方法.１材料与试剂 2006年三月采于山西晋祠2006年三月采于山西晋祠2006年月采于山西2006年月采于山西%乙醇，由天津市天心精细化工开发中心生产2供试菌种 Escherichia coli）枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。大肠杆菌（革兰氏阴性细菌）的数量是水源和食物被污染强度的标志枯草芽孢杆菌（革兰氏阳性细菌）和金黄色葡萄球菌（革兰氏阳性细菌）在空气中分布较多。以上菌种均由山西大学微生物教研室提供。 1．３培养基 　取牛肉膏g、蛋白胨g、氯化钠g、琼脂g、蒸馏水ml，加热溶化，调pH值为7，分装，灭菌，备用。 4主要仪器 ZDX-35B1型座式自动电热压力蒸汽灭菌器，DH4000A型电热恒温培养箱，培养皿，移液管，涂布，酒精灯，，物理天平5轮藻的制备 固液质量比92℃下水浴加热回流提取10-12h，到提取液颜色较浅为止，待冷凝液刚刚虹吸下去时，即可停止加热。稍冷却后，改成旋转蒸发装置，把提取液中大部分乙醇蒸出（回收），被浓缩的提取液再用容量瓶定容到50ml, 即得轮藻提物6供试菌液制备7抑菌试验　 7．１纸片法测定抑菌Genuine Whatman Filter Paper No.41 两种滤纸，用打孔器打成直径(φ)为５mm圆形小纸片，于洁净干燥的小培养皿中，干热灭菌（℃,２h，严格控制温度以避免纸片自燃）， 1．7．2数据处理与统计 1．7．3最低抑菌浓度（MIC）测定观察生长情况 ２结果与分析 1实验结果 2.1.1 纸片比较实验 实验数据记录见附表1至附表6。 不同滤纸对醇提液抑菌效果的影响，见方差分析表1 表1 纸片比较实验方差分析结果 Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 1.015 1 1.015 .890 .353 Within Groups 34.240 30 1.141 Total 35.255 31 2.1.2纸片法测定抑菌效果 本实验于3月26号、4月14号、4月26号、5月10号、5月18号和5月19号做了六次重复，实验结果记录见附表1至附表6。 2.1.2.1四种轮藻的醇提液对金黄色葡萄球菌的抑制作用比较，见方差分析表2。 表2 四种轮藻的醇提液对枯草杆菌抑制作用的方差分析结果 Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 2.715 2 1.357 1.312 0.275 Within Groups 79.676 77 1.035 Total 82.390 79 2.1.2.2四种轮藻的醇提液对枯草杆菌的抑制作用比较，见方差分析表3 表3 四种轮藻的醇提液对金黄色葡萄球菌枯草杆菌抑制作用的方差分析结果 Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 16.215 2 8.108 12.002 .000 Within Groups 74.982 111 0.676 Total 91.197 113 2.1.2.3拟丽藻（晋祠）醇提液对三种细菌的抑制作用比较，见方差分析表4 因拟丽藻和普生轮藻醇提液对大肠杆菌无抑制作用，故下面只比较对另两种菌的抑制作用 表4 拟丽藻（晋祠）醇提液对两种细菌的抑制作用的方差分析结果 Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 1.820 1 1.820 1.484 .227 Within Groups 96.865 79 1.226 Total 98.685 80 2.1.2.4普生轮藻（晋祠）醇提液对两种细菌的抑制作用