IL1β对体外海马神经干细胞增殖和分化的影响.pdfVIP

汕头大学硕士研究生论文 目 录 目 录…………………………………………………………………………………Ⅰ 中文摘要……………………………………………………………………………Ⅱ 英文摘要 ……………………………………………………………………………Ⅸ 缩 略 词……………………………………………………………………………… ⅩⅥ 一、前言 ………………………………………………………………………………1 二、材料和方法 …………………………………………………………………………4 三、实验结果 ………………………………………………………………………12 四、讨 论 …………………………………………………………………………29 五、总 结 …………………………………………………………………………37 参考文献 ……………………………………………………………………………38 文献综述 …………………………………………………………………………41 个人简历………………………………………………………………………………47 致 谢 ………………………………………………………………………………48 I 汕头大学硕士研究生论文 摘 要 背景和目的 抑郁的发病机制尚不清楚，关于抑郁的病因也有很多种理论假说，其中海马神经元的 损伤和再生障碍在抑郁的发病过程中越来越受重视。海马是大脑中神经元可再生的重要区 域之一，海马中的神经干细胞(Neural stem cells, NSCs)是神经元的前体细胞，对于神经元的 数量再生与维持有重要影响。体外实验表明炎性细胞因子白介素-1 β(interleukin-1 beta,IL-1 β)能抑制海马神经祖细胞的增殖，因此，研究 IL-1 β在抑郁症发病过程中的作用和机制， 不仅有利于揭示抑郁症的发病机制，也将为开发新型抗抑郁药物提供新的靶点。 本课题组前期的研究成果证明：腹腔注射脂多糖、腹腔注射利血平均可引起大鼠的行 为性抑郁，同时脑内不同区域的细胞因子 IL-1 β的升高，脑内注射 IL-1β 受体拮抗剂可以 部分改善这种行为性抑郁，给予腺苷受体拮抗剂咖啡因和 A2A 受体拮抗剂可以部分逆转这 种行为性抑郁；脑室内注射 IL-1 β可以诱导大鼠的行为性抑郁；体外 IL-1 β能剂量依赖性 的抑制海马神经元的活性，降低BDNF 表达,CREB-BDNF 通路可能在其中有着至关重要的 作用，NMDAR 可能参与其中。上述研究表明 IL-1 β与行为性抑郁有着密切的关系，关于 其分子生物学机制可能与抑制脑源性神经生长因子 ﹙BDNF) 的表达降低有关。 本实验拟进一步探究 IL-1 β对于神经元的前体细胞－神经干细胞活性的影响及其机 制，并研究 A2A 受体及 NMDA 受体在其中的作用，以及 IL-1 β对于神经干细胞分化成神 经元和星形胶质细胞的影响。 材料和方法 1. 海马神经干细胞的培养、鉴定 24h 内SD 大鼠新生鼠 3 －4 只，断头取脑，分离两侧海马，机械吹打成为单细胞悬液， 加入含 10%FBS 的DMEM/F12 培养液，置入 37℃、5 ％CO2 培养箱 30min，去除为成纤维 细胞，24h 后弃掉上清液，重新加入含 10%FBS 的DMEM/F12 新鲜培养液培养 72h，离心 II 汕头大