高考生物选修三必记知识点分析.pptVIP

* 高考生物必记知识点（选修3） 专题一　 基因工程 1.作为载体的条件 ①能在宿主细胞中稳定保存并大量复制。 ②有一个至多个限制性核酸内切酶切割位点，以 便与外源基因连接。 ③具有特殊的标记基因，便于筛选 2.载体的作用 ①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内； ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 3.DNA连接酶有Ecoli DNA连接酶和T4 DNA连接酶两 种，且DNA连接酶起作用时不需要模板。 4.限制酶在使用时的注意事项： ①切割目的基因和载体时，最好用同一种限制酶， 以产生相同的黏性末端。 ②在切割含目的基因的DNA分子时，需用限制酶切 割两次此DNA分子，产生4个末端。只有这样， 目的基因两端都有可连接的黏性末端或平末端。 ③限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏 标记基因，以便于进行检测。 5.未知序列的目的基因是无法从基因文库中获取的。 6. PCR技术扩增目的基因的过程： 加热至90～95℃DNA解链→冷却到55～60℃，引 物结合到互补DNA链→加热至70～75℃，热稳定 DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 7.基因表达载体的构建 (1)目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且 可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥 作用。 (2)组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因。 基因工程中构建基因表达载体需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割载体以获取与目的基因相同的黏性末端或平末端，再通过DNA连接酶连接目的基因和载体。 8.将目的基因导入受体细胞 植物细胞——农杆菌转化法（基因枪法、花粉管通 道法） 动物细胞——显微注射技术 微生物细胞——Ca2＋处理法 9.目的基因的检测和表达 分子水平检测： ①目的基因是否进入受体细胞—— DNA分子杂交 (DNA和DNA之间) ②目的基因是否转录出信使RNA——分子杂交技术 (DNA和RNA之间) ③目的基因是否翻译出蛋白质——抗原-抗体杂交方法 个体水平检测——抗虫、抗病的接种实验，以确定 是否有抗性以及抗性的程度；基因工程产品与天然 产品的活性比较，以确定功能是否相同等 10.蛋白质工程通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白 质进行改造，或制造出一种新的蛋白质，以满足人 类生产和生活的需求，是延伸出来的第二代基因工 程。 11.限制酶能识别特定的DNA序列，并在特定位点上 切割DNA，形成黏性末端或平末端 12.启动子为DNA序列，其具有RNA聚合酶结合位 点，能启动转录，合成RNA 13.用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞时，首先 将目的基因导入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，再利 用农杆菌侵染植物细胞，通过DNA重组将目的基 因插入植物细胞的染色体DNA上。 14.载体上的抗性基因主要是有利于筛选含重组DNA 的细胞，目的基因的表达与抗性基因存在与否无 关。 15.基因工程中有3种工具，但工具酶只有2种。工具 酶本质为蛋白质，载体本质为小型DNA分子，但 不一定是环状。 16.受体细胞中常用植物受精卵或体细胞(经组织培 养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物（大 肠杆菌、酵母菌等）。一般不用支原体，原因是 它营寄生生活；一定不能用哺乳动物成熟红细 胞，原因是它无细胞核，不能合成蛋白质。 17.应用DNA探针技术，可以检测转基因植物中目的 基因的存在，但不能完成对目的基因表达的检测。 18.目的基因必须借助载体才能导入受体细胞；目的 基因导入成功后，不抑制细胞原有的代谢途径。 19.用同一种限制酶分别切质粒和含有目的基因的 DNA，会切出相同的黏性末端，再用DNA连接酶 连接后，会出现目的基因-载体连接物、载体-载体 连接物、目的基因-目的基因连接物三种连接物， 再通过筛选才能够获得目的基因-载体连接物。 20.密码子具有简并性，基因序列不同，蛋白质可 以相同。 21.对蛋白质改造时，首先要知道蛋白质的结构， 有氨基酸序列构成的一级结构和折叠组装成的 空间结构。 专题