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核酸检测中的留样处理 主要内容 核酸检测 核酸检测 核酸检测 核酸检测 核酸检测 血液样本留取 血液样本留取 血液样本留取 血液样本留取 血液样本留取 血液样本留取 血液样本留取 留样后处理 留样后处理 2.立刻离心,3000转离心10分钟。 离心后检查: 留样后处理 3.离心后标本,2-8℃ 保存。 4. 2-8℃ 条件下,送至检验科,进行低温离心。 留样不当的后果 留样不当的后果 留样不当的后果 * * 核酸检测简介 核酸检测标本留样处理 1 2 什么是核酸检测呢? 核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物.有两类:(DNA)和(RNA) 组成 核酸(DNA) N个 相连 核酸是最基本的遗传物质,绝大部分生物的遗传物质都是核酸。 由核酸编码指导蛋白质的合成,从而形成多种多样的生物体。 核酸检测 酶免检测 通过一种叫做PCR的技术,在分子水平进行检测。 相比于现行的酶免检测,核酸检测可以显著的缩短窗口期。 乙肝:从50天缩短至25天 丙肝:从72天缩短至59天 Hiv病毒:从22天缩短至11天。 一次核酸检测的关键点 标本 整个反应体系的构建 实验前后的清洁消毒防污染处理 1. 血液中存在大量的PCR抑制物: 免疫球蛋白,蛋白酶,血红素,乳铁蛋白,肌红蛋白,多糖等等。 这些PCR抑制物的存在会干扰PCR反应的进行。 2. 环境中存在着核酸酶(RNA酶和DNA酶)可使核酸降解。 一次检测要检测出样本中极少的核酸含量,从而确定该袋血是否为合格血液。为了保证这极少量的核酸不被降解,以及PCR反应又能顺利进行。 因此,核酸检测对标本的要求很高! 分离胶 分离胶 首选EDTA和枸橼酸盐,避免使用肝素抗凝。无菌无DNA酶、无RNA酶:含分离胶的真空采血管; 采样前对样管进行检查: 确保试管无裂痕,无渗漏,管盖无松动,且在有效期内使用。 采血人员应严格按照《血站技术操作规程 2012版》和湘潭市中心血站《标本留取和标本交接操作规程》的要求进行采血留样。 1. 标本留取应检查是否足量,如量少,应更换采血管重新留取,杜绝开盖留取。 2. 留样方式:旁袋留样。 3. 留样顺序: 先留酶免管,后留核酸管。 1.贴献血序列号。贴于采血管正中位置,避免贴的过于靠上或者靠下。 试管有无渗漏破损。 血液检测量不符合要求。 溶血程度 核酸管上清液颜色 脂血程度 其他异常情况。 *
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