中医分期序贯治疗对哮喘大鼠气道重构MMP-9与TIMP-1表达影响的研究.pdf

中医分期序贯治疗对哮喘大鼠气道重构MMP-9及 TIMP-1表达影响的研究 中 文 摘 要 目的：利用免疫组化、Westernblot和实时荧光定量PCR方法检测 哮喘分期序贯治疗对哮喘大鼠气道重构肺组织中基质金属蛋白酶-9及其 -1 抑制剂 表达影响的研究，为哮喘的防治提供新的思路。 方法：SD大鼠随机分成7组，为哮喘模型组 （X组），正常对照组 （Z组），序贯治疗 1组 （A1组），序贯治疗2组 （A2组），序贯治疗 3 A3 M B Z 组（ 组），孟鲁司特钠组（ 组），布地奈德组（ 组），除 组 外，其余各组均以卵蛋白 （OVA）辅以氢氧化铝为佐剂与第1、8、15天 注射致敏，22天后隔天雾化吸入卵蛋白8周激发哮喘，建立哮喘模型。 8 A2 于实验第 天即第二次致敏的同一天开始， 组隔天胃饲金水六君煎加 减方20g/kg/d；A3组隔天胃饲六味地黄颗粒20g/kg/d；M组隔天胃饲白 三烯受体拮抗剂 (孟鲁司特 1mg/kg/d)；B 组大鼠隔天雾吸布地奈德 0.64ml/kg d （ ／ ）并予等量生理盐水胃饲，其余各组以生理盐水胃饲代替。 第22天开始激发，A1组急性期麻杏二陈汤灌胃，缓解期期和稳定期胃 饲生理盐水；A2组急性期麻杏二陈汤灌胃，缓解期胃饲金水六君煎加减， A3 稳定期胃饲生理盐水； 组急性期麻杏二陈汤灌胃，缓解期胃饲金水六 君煎加减方，稳定期胃饲六味地黄颗粒；M组激发后雾吸沙丁胺醇，缓 解期和稳定期胃饲孟鲁司特钠；B组激发后雾吸沙丁胺醇，缓解期和稳 X 7 定期雾吸布地奈德， 组以生理盐水胃饲代替，干预 周后分别运用免 疫组化、Westernblot和实时荧光定量PCR方法对SD大鼠进行MMP-9、 TIMP-1定位、定量表达的分析,拟从分子水平到基因水平上探讨哮喘大鼠 MMP-9 TIMP-1 肺组织 、 表达影响的生物学机制。 结果： （1）大鼠行为学表现 观察发现哮喘模型组 (X组)大鼠激发 逐渐出现躁动不安、打喷嚏、呼吸加快或俯卧少动、饮水增多、毛发渐 渐发黄，随着激发次数的增多，出现精神萎靡、反应迟钝、弓背、前肢 缩抬、节律性收腹样喘促,可闻哮鸣音，毛发渐渐枯槁发黄而无光泽，取 出后遗留屎尿较多，甚至出现双耳及口唇紫绀，更有甚者喘促至死。（2） 免疫组化法、Westernblot法和实时荧光定量PCR法结果均显示：①与正 常组比较，哮喘组大鼠肺组织中MMP-9及TIMP-1表达含量明显增高； ②与哮喘组比较，各治疗组对哮喘大鼠肺组织中MMP-9及TIMP-1 的表 达均有所降低。 结论： （1）哮喘时，MMP-9及TIMP-1 的表达均升高； （2）中药 分期序贯治疗具有通过降低哮喘大鼠肺组织中MMP-9及其抑制剂的表 达，调节两者比值达到阻止气道重构的重要机制之一。 关键词：哮喘，气道重构，基质金属蛋白酶-9，中医分期序贯治疗， 大鼠 SEffectsofTCMStagedSequentialTherapyon ExpressionsofMatrixMetalloproteinase-9andits InhibitorinAsthmaticRatswithAirwayRemodeling ABSTRACT Objective:The paper aims at verifying the effects of staged sequential therapy on expressions of matrix metalloproteinase-9(MMP-9) and its inhibitor TIMP-1 within lung tissues in asthmatic rats with the airway remodeling, by appl