碱性磷酸酶(AKP)解答.pptxVIP

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2017-05-09 发布于湖北
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碱性磷酸酶(AKP)解答.pptx

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碱性磷酸酶（ALP）;功能结构催化机理金属离子的作用;功能：将底物分子(核酸、蛋白质、生物碱)上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基。一般用于催化核酸分子脱掉5’磷酸基团，从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。;二聚体蛋白中央：10层β-折叠；两侧：15个不等的α-螺旋；顶部：单一的α-螺旋、三层β-折叠。每个亚基含499个AA，均具有一个活性中心酶中心有一个空腔口袋，用于与磷酸酯结合。;?;催化机理;①锌离子在碱性磷酸酶中有广义Lewis酸的作用，极化底物，使之成为一个良好的亲电试剂。;②酶与底物以金属离子Zn为桥接点，金属将底物磷酸引导到正确的位置（Ser-活性部位），使酶促反应顺利进行。;③金属Zn1中和离去基团的负电荷，是RO―能够顺利离去。;④Mg定位了水分子，催化Ser-102的质子化和去质子化的反应。;①锌离子在碱性磷酸酶中??广义Lewis酸的作用，极化底物，使之成为一个良好的亲电试剂。 ②酶与底物以金属离子Zn为桥接点，金属将底物磷酸引导到正确的位置（Ser-活性部位），使酶促反应顺利进行。 ③金属Zn1中和离去基团的负电荷，是RO-能够顺利离去。 ④Mg定位了水分子，催化Ser-102的质子化和去质子化的反应。;①可直接参与磷代谢，在钙、磷的消化、吸收、分泌及骨化过程中发挥了重要作用 ②在基因工程中主要是应用该酶处理经限制性内切酶切割后的载体DNA，去除载体DNA两末端的5′-磷酸残基，以防止载体DNA自我环化，从而提高其重组效率。 ;谢谢