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2. 实验分组:成年雄性Wistar大鼠40只,体重180-200g,随机分为4组,每组10只 左侧为实验侧,右侧为正常自身对照侧 解放军武汉总医院骨科 广州军区骨科研究所 解放军骨创伤救治中心 A、PNGF导管组 B、PNGF复合BMSCs组 C、 PNGF复合BMSC-NCs组 D、自体神经移植组 B C D A 解放军武汉总医院骨科 广州军区骨科研究所 解放军骨创伤救治中心 3. 手术方法 A组:0.8%戊巴比妥钠40mg/Kg腹腔注射麻醉后,固定四肢,备皮,术野消毒、铺巾,沿左大腿后外侧做纵行切口,充分暴露坐骨神经,距梨状肌下缘下造12mm坐骨神经缺损。显微镜下将两断端各植入导管内2mm,10-0无创线将神经外膜与管壁缝合3针固定 B、C组在导管固定后,分别于两侧向导管内注入上述两种细胞各10ul(即每根导管内注入细胞5×105个细胞) D组(自体神经移植组)切除12mm坐骨神经作为移植段,将移植段神经逆行放置,缝合神经外膜 逐层缝合切口,分笼喂养。 小腿三头肌湿重恢复率 电生理 小腿三头肌细胞截面积恢复率(HE染色) 组织学评价 坐骨神经功能指数 大体与形态学观察 实验动物 HE染色 亚甲蓝髓鞘染色 图像分析 4.监测指标 解放军武汉总医院骨科 广州军区骨科研究所 解放军骨创伤救治中心 术后切口愈合良好,无异物反应 术后2w出现不同程度红肿、溃疡 解放军武汉总医院骨科 广州军区骨科研究所 解放军骨创伤救治中心 5.结果 解放军武汉总医院骨科 广州军区骨科研究所 解放军骨创伤救治中心 SFI=-38.3[(EPL-NPL)/NPL]+109.5[(ETS-NTS)/NTS] +13.3[(EIT-NIT)/NIT]-8.8 *B、C、D组与A组比较,p<0.001 5.1.坐骨神经功能指数 解放军武汉总医院骨科 广州军区骨科研究所 解放军骨创伤救治中心 5.2.电生理 # *B组与A组比较,p<0.05;△D组与B组比较,p<0.05;#C、D组与A组比较,p<0.001 MCV测定方法 解放军武汉总医院骨科 广州军区骨科研究所 解放军骨创伤救治中心 5.3.小腿三头肌湿重恢复率 *B、C、D组与A组比较,p<0.001;#D组与B组比较,p<0.05 5.4.肌细胞截面积恢复率 A组 B组 C组 D组 正常 *B、C、D组与A组比较,p<0.001 解放军武汉总医院骨科 广州军区骨科研究所 解放军骨创伤救治中心 5.5.再生神经 再生神经切片图示 各组再生神经 解放军武汉总医院骨科 广州军区骨科研究所 解放军骨创伤救治中心 再生神经组织学观察 HE染色 亚甲蓝染色 A组 B组 C组 D组 解放军武汉总医院骨科 广州军区骨科研究所 解放军骨创伤救治中心 *B、C、D组与A组比较,p<0.001 *B、C、D组与A组比较,p<0.001;#D组与B组比较p<0.01 *B、C、D组与A组比较,p<0.001;#D组与B组比较p<0.01 * # 七、结论 1、PRGD/PDLLA/β-TCP复合型神经导管应用于临床修复上肢周围神经缺损15例,其中11例患者感觉与运动功能不同程度恢复,改善率达73.3%,疗效等同于同类产品的临床性能,能有效促进周围神经再生,未见不良反应,可作为周围神经损伤较理想的替代疗法。 2、联合利用碱性成纤维生长因子和表皮生长因子可在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞定向分化为神经样细胞,与PRGD/PDLLA/β-TCP/NGF复合可成功修复大鼠12mm坐骨神经缺损,修复效果与自体神经移植相近。 解放军武汉总医院骨科 广州军区骨科研究所 解放军骨创伤救治中心 “运动功能”为视频 高频B超:P为近端,D为远端 视频 高频B超:P为近端,D为远端 新型人工神经导管修复周围神经缺损的临床应用 王华松 张伟才黄继锋 蔡贤华 付强 黄一拯 吴刚 广州军区武汉总医院骨科 解放军骨创伤救治中心 广州军区骨科研究所 湖北省骨创伤医学研究中心 解剖特点 骨折分型 康复锻炼 手术入路 内固定方式选择 临床应用 解剖特点 背 景 骨折分型 动物实验 典型病例 研究计划 Key words 周围神经损伤和缺损的治疗是显微外科的难题之一,为解决自体神经来源有限、异体神经存在免疫源性等问题,众多学者致力于可替代移植物的开发。 热点:组织工程化人工神经 解放军武汉总医院骨科 广州军区骨科研究所 解放军骨创伤救治中心 Background 周围神经组织结构 基底膜 无髓神经 有髓神经 RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸) 基底膜的主要成分: 纤维粘连蛋白 基膜粘层
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