呋喃唑酮，呋喃妥因与加替沙星的化学发光酶联免疫吸附检测法的建立.pdfVIP

山东大学硕士论文 传统的比色ELISA法相比，化学发光ELISA法有着更好的灵敏度和检测下限。用此 抗体检测呋喃唑酮在养殖用水中的添加回收率，批间回收率范围在83．103％之 间，批内回收率范围在78．113％之间。批间变异系数在5．27％之间，批内变异 系数在4—18％之间。 对于呋喃妥因，其免疫原和包被抗原的合成方法与呋喃唑酮类似。也是从 代谢产物AHD出发，衍生为CPAHD后，用混合酸酐法与活化的牛血清白蛋白 (cBSA)偶联合成了免疫原，免疫新西兰大白兔制得多克隆抗体。用戊二醛法将 AHD与卵清蛋白(OVA)偶联合成包被抗原。对呋喃妥因，其抗体用间接竞争 CPAHD的交叉反应比较明显外，和其他药物的交叉率均很小。用此抗体检测呋 喃妥因在养殖用水中的添加回收率，批间回收率范围在93．2．110％之间，批内 回收率范围在87．6．113．5％之间。批间变异系数在6．19％之间，批内变异系数在 3．16％之间。 对于加替沙星，其免疫原和包被抗原由EDC法制各。其抗体用间接竞争化 他氟喹诺酮类药物的交叉反应均很小。用此抗体检测加替沙星在牛奶样品中的添 加回收率，批间回收率范围在93．103％之间，批内回收率范围在89．105％之间。 批间变异系数在5．16％之间，批内变异系数在4-10％之间。 通过对硝基呋喃类和氟喹诺酮类药物的研究，我们成功地制备了呋喃唑 酮，呋喃妥因和加替沙星的免疫原及包被抗原，并通过动物免疫制备了相应的多 克隆抗体。基于这些抗体，我们建立了呋喃唑酮，呋喃妥因和加替沙星的化学发 光美联免疫吸附检测法，并且验证了与传统的比色ELISA法相比，化学发光ELISA 法有着更好的灵敏度和检测下限。为最终开发商品化的检测试剂盒打下了良好的 基础，并为其他药物抗体的制备和检测试剂盒的开发开辟了道路。 关键词：药物残留；抗体；呋喃妥因；AHD；呋喃唑酮；AOZ；加替沙星；化 学发光酶联免疫检测(C【广ELISA) 2 山东大学硕士论文 Abstract Withthefasteconomic modemanimal has growth，the husbandrydevelopedvery inrecent the residuecaused theabuseofantibioticshas rapidly years．Anddrug by becomeseriouseconomicandsocial whichthreathumanhealth．Nitrofurans problems areartificial antibiotics．Because and(Fluoro)quinolonessynthesized broad-spectrum are and are usedtotreatanimaldiseasesas theycheapeffective，也eywidely or feed theabuseofthese in additives．But resultinevitable drugs drugresidues，causing side—effectssuchas and tobacterial carcinogenicity mutagenicity；contributing resistanceand f00