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核型分析中常见问题及解决 中山大学中山医学院 医学遗传教研室 陈争 正常人类G显带染色体识别要点 如何提高染色体异常发现率 如何提高分析效率和准确率 常见问题及解决 正常人类G显带染色体识别要点 最长；着丝粒位于l/2处；短臂远侧段有一段很长的淡染带；长臂副缢痕紧贴着丝粒，着色深度和宽度大小不一,另有4条分布较均匀的深带 染色体长度排第二；着丝粒位于l/2处；带纹多，排列紧密，状如一串鞭炮。 1 2 着丝粒位于l/2处，染色较浓；在长臂和短臂的近侧段各具有一条明显而宽的深带，似领带结；短臂近末端的深带较窄, 似瓜皮帽，可以此来区别长短臂。 着丝粒位于l/4处；长臂可见四条均匀分布的深带。 3 4 中段三条深带染色较浓，靠得很近，有时融合成一条宽阔的深带，似柔道运动员的腰带；其两侧各有一较宽阔的浅带。 着丝粒位于3/8处；短臂中段有一条明显而宽阔的浅带，白如人脸；长臂带纹多。 5 6 着丝粒着色浓；短臂有“瓶盖”；长臂第1和第2深带宽而且染色浓。 短臂两条深带之间有一较明显的浅带；长臂三条分界极不明显的深带，且经常是由浅到深，远侧的深带着色较浓。 7 8 着丝粒着色浓；长臂近侧呈现出一段不着色区，紧随二条明显的深带。 着丝粒着色浓；长臂可见明显的三条深带，由深到浅，近侧的一条深带着色最深。 9 10 着丝粒位于3/8处，长臂近侧的深带与近中段深带之间有一宽阔的浅带 染色体较细长；长臂中段的深带区宽阔，近侧深带和中段宽阔的深带区之间的浅带较11号染色体窄。 12 11 长臂可见4条均匀分布的深带，中间两条深。 长臂末端有一较宽的浅带。 长臂近末端有一染色浅的深带，因此末端很平整。 13 14 15 着丝粒约在l/2～3/8处，靠近着丝粒有一着色浓、大小不一的副缢痕 长臂远侧段可见一条深带，这条带与着丝粒之间为一明显而宽的浅带 长臂近侧和远侧各有一条明显的深带 18 16 17 短臂和长臂均染色浅，着丝粒及其周围染色深。 着丝粒区深染，短臂近末端有一条明显的深带，而长臂染色浅，好似头重脚轻。 19 20 着丝粒区着色淡，长臂近侧有一明显而宽的深带。 着丝粒区着色浓，长臂着色淡。 21 22 着丝粒位于3/8处,其长度介于7号和8号染色体之间；短臂中段有一明显的深带，长臂近似距离处也有一明显的深带，称对称带。 整个长臂染色深。 X Y 如何提高染色体异常发现率 一、熟悉染色体病的特点，从严掌握染色体分析的适应征 1.有明显的生长、发育异常和/或多发畸形 2.原因不明智力发育不全 3.男性不育，女性原发闭经或不孕 4. 有习惯性流产史的夫妇 5. 两性外生殖器畸形 6. 血液系统肿瘤辅助诊断及追踪疗效 7. 接触各种致畸物质需估计危害程度 8. 染色体异常患者的双亲及直系亲属 二、提高染色体标本质量 1. 严格无菌操作，防止污染 2. 避免多次冻溶，保持培养基营养成份和活性物质的功能 3. 保证适量PHA的效价 4. 选择适当的加秋碱时间和量 5. 选择适当的离心速度和时间 6. 选择适当的低渗液和低渗时间 7. 注意吹打的手式和力度 8. 提高滴片质量，保证细胞均匀分布 9. 根据不同质量的胰酶效价，选择适当的胰酶浓度和消化时间 10. 选用高质量的Giemsa染液，调整好染色时间 三、提高分析水平 1. 坚持显微镜下分析 2. 避免重复 3. 选择适当分散的中期分裂相计数并保证分析量 4. 挑选3个以上适当长度和带纹好的分裂相进行核型分析 5. 注意区分真假嵌合体 6. 遇到某些染色体弯曲、重叠或带纹不清时，需2个以上其它分裂相证实是否有异常 7. 遇到某些分裂相有数目改变时，要加大染色体计数的量 8. 注意单细胞性染色体结构异常 9. 在确定染色体结构异常时，最好挑选染色体长、带纹数多且清晰的分裂相 如何提高分析效率和准确率 一、结合临床症状，有选择地特别注意特殊染色体 二、选择适当分散的中期分裂相进行计数分析 三、核型分析时按顺序进行，注意同源染色体比对 四、避免阅片时重复 五、遇到有结构异常时，挑选长的、异常染色体断裂点带纹清晰的进行进一步分析 常见问题及解决 一、培养失败 1. 细菌或支原体污染，细胞凝固 2. 培养液有问题，如器材洗涤不合要求 、配置溶液的三蒸水不合格 、PHA或牛血清效价低、培养液PH值不对、多次冻溶或培养液过期等 3.