蛋白质共价修饰教程.ppt

高级生物化学 2011 第5章 蛋白质的共价修饰 主讲 王保莉 第5章 蛋白质的共价修饰 Protein Covalent Modification 5.1 蛋白质的共价修饰 5.2 蛋白质的可逆磷酸化作用 5.3 蛋白激酶 5.4 蛋白磷酸酶 5.5 蛋白质可逆磷酸化的生物学意义 蛋白质的翻译后修饰，通常是蛋白质在核糖体由RNA翻译出来之后，受到特定的信号的刺激才发生。 共价修饰分为两大类，一类是将小分子、或者小的蛋白质通过共价键与蛋白质特定的氨基酸残基结合，另一类是蛋白质主链可以被特定的酶在特定的位置切断，比如MHC复合物识别的短肽段，就需要先利用蛋白酶体将外源的蛋白质切成短肽。 蛋白质的共价修饰已经发了四个诺贝尔奖，第一个是1992年发给磷酸化的发现，第二个是2001年CDK/Cyclin介导的磷酸化在细胞周期的功能，第三个是泛素化调控蛋白质降解(化学奖)，第四个是2002年Caspase介导的蛋白质切割和细胞凋亡。 引 言 新生多肽链离开核糖体很少是有功能的，多数都必须经过翻译后修饰才会转变为成熟的蛋白质。 原核细胞和真核细胞的蛋白质合成分别以甲酰蛋氨酸（fMet）和甲硫氨酸（Met）起始，而成熟蛋白质N-端没有fMet，很少为Met，因为在肽链合成尚未完成时N-端已被去甲酰基酶和氨肽酶修饰过。 分泌蛋白和膜蛋白以及线粒体和叶绿体蛋白均以前体形式合成，N-端的信号序列在分拣运输中已被切除。 许多蛋白质要分别经过甲基化、羟基化、糖基化、羧基化、磷酸化、乙酰化、脂酰化和异戊烯基化等共价修饰。 本章将重点介绍蛋白质可逆磷酸化作用。 新合成多肽链加工 原核生物和真核生物的一些新生蛋白质都需要经过翻译后修饰的一次或多次加工反应才最终获得具有生物活性的构象。 包括：氨基末端和羧基末端的修饰 信号序列的切除 个别氨基酸的修饰 糖类侧链的连接 异戊二烯基团的添加 辅基的加入 蛋白酶的加工 二硫键的形成 个别氨基酸的修饰 糖蛋白中常见的糖-肽连接键 以GalNAc和GlcNAc为例 GalNAc：乙酰氨基半乳糖 GlcNAc：乙酰氨基葡萄糖 辅基的加入 共价连接的辅基是许多原核和真核蛋白质发挥活性所必需的。 乙酰CoA羧化酶的生物素和细胞色素c中的血红素基团。 乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA catboxylase) 催化: 乙酰CoA＋ATP＋HCO3-→丙二酰CoA+ADP＋Pi 生物素酶。 FIGURE The acetyl-CoA carboxylase reaction. Acetyl-CoA carboxylase has three functional regions: biotin carrier protein (gray); biotin carboxylase, which activates CO2 by attaching it to a nitrogen in the biotin ring in an ATP-dependent reaction ; and transcarboxylase, which transfers activated CO2 (shaded green) from biotin to acetyl-CoA, producing malonyl-CoA. The long, flexible biotin arm carries the activated CO2 from the biotin carboxylase region to the transcarboxylase active site, as shown in the diagrams below the reaction arrows. The active enzyme in each step is shaded blue. 蛋白酶的加工 许多蛋白质的初始合成产物很大，这种无活性的蛋白质前体经蛋白酶的作用，产生较小的有活性的蛋白质。 例如：胰岛素、一些病毒蛋白质、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶 蛋白酶切的酶原激活 5.1 蛋白质的共价修饰 5.1.1 蛋白质前体的加工性部分水解 5.1.2 氨基酸残基的修饰 5.1.3 蛋白质与脂类共价结合 5.1.4 泛素化及泛素样修饰 5.1.5 组蛋白的共价修饰 5.1.1 蛋白质前体的加工性部分水解 酶原的激活、前体在分拣运输中发生裂解切去N-端的信号序列。 动物细胞内有多种加工