高中生物选修三复习课件.pptxVIP

【一、基因工程】一、DNA重组所需的三种工具：1、限制性内切酶——“手术刀”作用：切割磷酸二酯键①EcoRⅠ→产生粘性末端②SmaⅠ→产生平末端2、DNA连接酶——“分子缝合针”作用：链接磷酸二酯键①E˙coliDNA连接酶→连接粘性末端②T4DNA连接酶→连接平末端或粘性末端3、载体——“分子运输车”条件：①有一个或者多个限制酶切割位点②能自我复制③有特殊的标记基因（常用质粒作为载体）二、基因工程的基本操作程序目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定1、目的基因的获取（1）从基因文库获取（2）利用PCR技术扩增目的基因（3）人工合成比较项目DNA复制PCR技术区别解旋方式解旋酶催化DNA在高温下变性解旋场所细胞内(主要在细胞核内)细胞外(主要在PCR扩增仪中)酶解旋酶、DNA聚合酶耐热的DNA聚合酶温度细胞内温和条件控制温度，需90℃～95℃高温结果合成DNA分子合成DNA片段或基因联系(1)模板：均需要脱氧核苷酸双链作为模板(2)原料：均为四种脱氧核苷酸(3)酶：均需DNA聚合酶(4)引物：都需要引物，使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸PCR技术与DNA复制的比较质粒DNA分子限制酶处理一个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因DNA连接酶重组DNA分子（重组质粒）——核心同一种2、基因表达载体的构建①过程：:②组成：必须有启动子、目