第七章 植物离体繁殖.ppt

22 第七章 植物离体繁殖 植物离体繁殖: 利用组织培养技术对外植体进行离体培养，短期内获得遗传性一致的大量再生植株。也叫快繁或微繁（propagation in vitro. Micropropagation)。 和传统方法突出特点： 1、繁殖效率高:增值率高，生长速度快，可周年生产，在一个短暂的时间，由单一个体开始，能产生出大量的遗传组成相同的植株。 2、培养条件可控性强：人为提供培养基及小气候，便于对环境进行控制，省去田间栽培繁杂劳动。 3、便于管理、占地面积小：30m2可存放1万多培养瓶，约10万多苗木。 4、利于种质资源的保存及交换。 快速繁殖的应用 （1）短期内获得大量形状优良、整齐一致的种苗群体。加快 引进新种、新育良种的繁殖，促进优良品种推广和应用。 （2）大量繁育原来常规方法不能进行无性繁殖、难繁殖和繁 殖速度慢的一些植物，尤其对一些珍、稀、濒危的植物 的繁殖有更重要的意义。 （3）作为培育新品种的有效手段，繁殖和保存育种材料。如 远缘杂种、多倍体、突变体。 （4）通过茎尖培养等技术脱毒，扩增脱毒苗，达到提纯复壮 良种的目的。 第一节 植物快繁的器官形成方式 由于植物种类不同，器官再生及快速繁殖的方式也不同。 1、短枝发生型：外植体为带叶单芽茎段， 培养为完整植株。特点：一次成苗， 培养过程简单，容易移栽成活，遗传 形状稳定，如葡萄、红薯等试管苗繁殖。 2、器官型（Organ type）：外植体带有 顶芽或腋芽。培养后形成丛生芽，转 入生根培养基，诱导生根成苗，扩大 繁殖。特点：由单芽到丛芽，繁殖速 度快，遗传形状稳定，多数花卉、苗木 的快繁属于次类。 3、器官发生型（Organogenesis）： 直接由外植体上或从愈伤组织产生 不定芽，经过脱分化与再分化成苗。 特点：繁殖速度快，有由愈伤组织 再生植株，遗传不稳定。烟草、水 稻、小麦、番茄等。 4、胚胎发生型（Embryogenesis）： 外植体脱分化产生愈伤组织或细胞团， 再分化为胚状体产生小植株。一般胚 状体发生经过：球形期、心形期、鱼 雷期、子叶期。特点：发生数量大， 速度快，结构完整，人工种子繁殖，遗传变异。 5、原球茎发生型（Protocorm）：兰科。 茎尖或腋芽外植体通过形成原球茎， 而发育为完整植株。 第二节 植物快繁的程序和关键技术 离体无性繁殖的程序包括： 1、无菌母株的制备 初代培养： 在无菌条件下，制备无菌繁殖的材料称为无菌母株，或繁殖母株（stock plant)。培养基激素配比，取材的年龄、大小和生理状态。初代培养的启动生长方式:腋芽被刺激后生长;茎段、叶片、其它器官伤口处产生不定芽；外植体切口产生愈伤组织。此阶段一般需要4-6周。 2、继代芽的增殖 无菌母株再次切割继代培养，芽分化增殖成丛芽，加快繁殖速度。在快速繁殖过程中，随培养时间和继代次数增加，芽分化和生长速率降低，称为驯化现象，与内源激素和恒定培养条件有关，故可以调节激素配比或变温处理，提高繁殖速度。 3、芽苗生根培养  诱导无根苗生根的方法有两种： 1）试管内生根： 将无菌小枝条转入生根培养基中进行培养。 生根培养基中的营养元素含量往往降低、需要适当提高生长素类物质（NAA,IBA)的浓度，降低细胞分裂素的浓度。降低无机盐和有机物含量，如一般1/2MS或1/4MS培养基。 2）试管外生根： 有些植物可以将离体条件下形成的枝条， 在基部切口处用生根粉或与滑石粉混合的 IBA涂抹，然后种植到温室或田间中。 这样的方法可大大降低成本。 4、再生植株的锻炼和移栽 A、移栽前后培养条件发生改变： 试管苗：恒温、高湿、弱光、无菌、充足的营养。 自然条件下，变温、低湿、强光、有菌、缺乏营养。 B、移栽后植株死亡的原因: 1）根系结构不完善:不生根（木本植物）、根与芽的输导组织不相通（愈伤组织）、再生根的吸收功能差。 2）叶部结构不完善：缺少角质层或蜡质层，保水性差；缺乏叶表皮毛，保湿、反光性差；气孔开度过大，关闭能力差；叶片中栅栏组织发育不完善，光合能力低。 C、克服这些因素的方法： 要在培养瓶中培育壮苗、开瓶后要练苗。 壮苗的措施： 培养基中加入适宜的生长延缓剂（多效唑、矮壮素、B9等）。 练苗的措施： 1）日光锻炼：恢复、提高叶片的光合作用的能力，使小苗由 异养向自养过渡。 2）湿度锻炼：移栽前，开瓶练苗，使小苗逐步适应周围的湿