第3章转录解答.ppt

转录及其调控 转录(transcription) 生物体在遗传信息传递过程中，以DNA为模板，在DNA依赖的RNA聚合酶催化下，以4种三磷酸核苷为原料，合成RNA分子的过程 原核生物转录 RNA聚合酶直接与模板DNA启动序列结合启动转录。 转录过程分为起始、延长和终止三个阶段。 起始需要RNA聚合酶全酶，延长仅需核心酶。 终止分为依赖ρ因子和不依赖ρ因子两种机制。 原核生物转录相关因子 ρ因子：六聚体蛋白、依赖ATP的解旋酶活性。 其他因子：nusA蛋白，识别新和成RNA分子中的终止信号 原核生物转录过程 原核生物转录起始： RNA聚合酶与模板DNA的启动子辨认结合 启动子：RNA聚合酶识别、结合并起始转录的一段高度保守性DNA序列 RNA链的延伸 核心酶向前移动， NTP不断聚合，RNA链不断延长 核心酶覆盖双链DNA和RNA复合物，向前推进，边解开螺旋边释放出新合成的RNA链，已经转录的区域中分开的DNA链又重新形成双螺旋 原核生物转录终止 终止子：DNA分子中终止转录的核苷酸序列 。 不依赖Rho (ρ)因子的转录终止 依赖Rho (ρ)因子的转录终止 真核生物转录 三种RNA pol识别不同启动子。 转录起始过程需要很多转录因子（transcription factor, TF ）参与，按一定顺序与DNA形成复合物，协助RNA pol定位于转录起始点 RNA-pol前移会遇到核小体，转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象 真核生物转录终止于转录产物的加工密切相关 真核生物转录酶及相关因子 转录因子 (transcription factor, TF)：是一类细胞核内蛋白因子，通过与顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用调节转录的活性 基本转录因子—RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子 特异转录因子—结合在转录核心元件以外的其他上游顺式作用元件的蛋白因子，通过DNA与蛋白之间的相互作用影响转录的效率 真核生物mRNA的成熟 5’端形成特殊的帽子结构 3’端切断一段序列并加上poly A尾巴 通过剪切去除由内含子转录来的序列 链内部核苷酸甲基化 1） 5’端加帽及其重要性 a. 翻译起始的必要结构，为IF3（起始因子）和核糖体对mRNA的识别提供信号 b. 增加mRNA的稳定性，保护mRNA 免遭5’外切核酸酶的攻击 c. 运输，有助于mRNA越过核膜，进入胞质 2） 3’端加尾及其功能 与mRNA从细胞核转送到细胞质有关 稳定mRNA结构，保持生物半衰期 与真核mRNA的翻译效率有关：缺失可抑制体外翻译的起始，含 poly(A) 的mRNA 失去 poly(A) 可减弱其翻译 稳定帽子结构 真核生物tRNA的成熟 真核生物rRNA的成熟 初始转录本为45S前体，18S，5.8S和28S rRNA 是一个转录本 5s rRNA前体独立于其他三种rRNA的基因转录 前体rRNA与蛋白质结合，然后再切割和甲基化 剪切和甲基化均需要小核仁RNA（snoRNAs）的参与 转录调控 基因表达是多级水平上进行的复杂事件，分为： 转录水平、转录后水平（加工及转运）、翻译水平及翻译后水平，但以转录水平的基因表达调控最为重要 转录调控涉及特异的转录调节蛋白与转录调控区DNA之间的相互作用，可产生正或负的调控效果 原核生物转录调控的特点 σ因子决定RNA聚合酶识别的特异性 操纵子模型的普遍性：多个功能相关的原核基因串联在一起，依赖同一转录调控区对基因的转录进行调节，以确保功能相关基因之间表达的协调性 以负性调节为主：阻遏蛋白与操纵基因结合，抑制转录起始 原核生物转录起始调控 操纵子的基本组成 1.乳糖操纵子 乳糖操纵子的协调调节 原核生物转录终止调控 依赖ρ因子的转录终止调控 不依赖ρ因子的转录终止调控 衰减子介导的转录终止调控 色氨酸操纵子的结构 色氨酸操纵子的转录调控机制 真核生物转录调控 瞬时调控：或称为可逆调控，相当于原核细胞对环境条件变化作出的反应 发育调控：不可逆调控，决定了真核细胞生长、分化、发育的全部进程 真核生物转录调控的特点 有多种RNA聚合酶（RNA polⅠ、Ⅱ、Ⅲ），单独没有活性，必须与转录因子共同作用 通过顺式作用元件和反式作用因子调节转录的起始 转录激活状态的染色质结构发生明显变化 正性调控占主导地位 真核生物转录前调控 染色质结构对转录的影响：具有转录活性的活性染色质 染色质DNA对DNaseⅠ更敏感 正转录的DNA甲基化程度降低 常缺乏组蛋白H1，其他核心组蛋白则被乙酰化或与泛素相结合而修饰 非常活泼的转录区，如许多真核生物的rRNA基因处，没有核小体结构 DNA的修饰：甲基化与去甲基化 DNA甲基化能关闭某些基因的活性，去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。 甲基化常发生在基因5′侧区的CpG