原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
查看更多
实验室常用试剂、缓冲液的配制方法
1 M Tris-HCl (pH7.4，7.6，8.0)
组份浓度1 M Tris-HCl
配制量 L
配制方法 1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.按下表加入浓HCl量调节所需要的pH值。
pH值 浓HCl 7.4 约70 ml 7.6 约60 ml 8.0 约42ml 4.将溶液定容至1 L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高l℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1.5 M Tris-HCl (pH8.8)
组份浓度 15 MTris-HCl
配制量 1 L
配制方法 1.称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓HCl调节pH值至8.8。
4.将溶液定容至1 L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高l℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6，8.0)
组份浓度 100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA
配制量 1 L
配制方法 1.量取下列溶液，置于l L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4，7.6，8.0) 100 ml 500 mM EDTA(pH8.0) 20 ml 2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。
3.将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
3 M醋酸钠(pH5.2)
组份浓度 3 M醋酸钠
配制量 100 ml
配制方法 1.称量40.8 g NaOAc·3H2O置于100~200 ml烧杯中，加入约40 ml的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰醋酸调节pH值至5.2。
3.加去离子水将溶液定容至100 ml。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
PBS Buffer
组份浓度 137 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4
配制量 1 L
配制方法 1.称量下列试剂，置于l L烧杯中。
NaC8 g KCl 0.2 g Na2HPO4 1.42 g KH2PO4 0.27 g 2.向烧杯中加入约800 m的去离子水，充分搅拌溶解。
3.滴加浓HCl将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
10 M醋酸铵
组份浓度 10 M醋酸铵
配制量 100 ml
配制方法 1.称量77.1 g醋酸铵置于100~200 ml烧杯中，加入约30 ml的去离子水搅拌溶解。
2.加去离子水将溶液定容至100 ml。
3.使用0.22 μm滤膜过滤除菌。
4.密封瓶，室温保存。
注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。
Tris-HCl平衡苯酚
配制方法 1.使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色，应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚，结晶苯酚必须，160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物，这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此，苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要，我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。
2.操作注意：苯酚腐蚀性极强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。
3.苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相，因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡
文档评论（0）