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家兔呼吸运动的调节 实验目的 掌握 家兔耳缘静脉注射法 家兔颈部手术操作、气管插管技术 记录家兔呼吸曲线 观察 增加无效腔、气道阻力、肺牵张反射等因素对呼吸运动的影响 了解 各种因素影响呼吸运动的机制 实验原理 人体及高等动物的呼吸运动能持续有节律的进行,是由于体内调节机制的存在。正常节律性呼吸运动是在呼吸中枢神经系统参与下,通过多种传入冲动的作用,反射性调节呼吸的频率和深度来完成的。 呼吸运动受神经以及血液中O2,CO2,[H+]等物质浓度调节。 肺的牵张反射通过迷走神经传导调节信号,通过这个反射弧来参与呼吸节律的调节。 实验材料 1、动 物:家兔 2、器 械:动物手术器材(手术刀、手术剪、止血钳、玻璃分针, 丝线,注射器,兔台),气管插管,体重秤,张力换能器,生理信号采集系统,医用橡皮管,纱布,20 ml 注射器,玻璃分针。 3、药品和试剂:20%氨基甲酸乙酯,0.9%生理盐水,医用酒精。 1. 称重、麻 醉 一只手轻抓住兔子颈部皮肤,另一只托住兔子尾部,将兔子自笼中取出称重; 称重后使用20%氨基甲酸乙酯麻醉 (给药量:5 ml/kg WT, 耳缘静脉注射) 。 实验方法 2. 家兔固定和剪毛 家兔麻醉后,使其腹部朝上仰卧于兔台上,用线固定四肢和头部;用金冠剪刀贴在皮肤表面剪除手术部位的毛发。 3. 颈部手术 颈部正中切口—分离软组织—暴露气管—钝性分离气管,底下穿棉线备用—气管倒T形切口,插入Y形气管插管,棉线固定; 钝性分离气管双侧迷走神经—各自穿线备用(粗—迷走神经,中—交感神经,细— 减压神经)。 图 1 家兔气管插管过程示意图 家兔气管插管过程注意事项 插管的手术切口可以在气管软骨环间,也可以在软骨环上。切口若在软骨环间,容易做切口,但易出血;切口若在软骨环上,出血较少,但切口难度较大; 插管时如果发现气管内有血,一定要先将血液清除; 插管的深度不可过浅,至少要插入3个软骨环以上; 结扎棉线一定要结扎在软骨环之间,这样插管结扎得比较牢固。为了防止插管滑脱,一般还要将棉线绕过插管的侧管再结扎一次。 4. 装置连接 用金属钩钩住家兔胸部部皮肤,并系线与张力传感器的应变梁相连,张力传感器与生理信号采集器的输入通道相连; 打开PC-lab 软件,选择呼吸实验的模板,点击采样,收集家兔呼吸运动曲线。 5. 实验观察 记录平静呼吸的运动曲线,识别呼气和吸气各自对应的曲线方向,计算呼吸频率并测量强度; 增加无效腔对呼吸运动的影响:分别将两根长约50 cm和5cm、内径1 cm的橡皮管连于气管插管的侧管上,然后用止血钳夹闭短橡皮管一侧,以增加无效腔。观察并记录家兔的运动呼吸曲线,计算呼吸频率并测量强度,分析该因素引起呼吸运动变化的机制; 气道阻力对呼吸运动的影响:待呼吸运动恢复正常后,将气管插管的两个侧管同时夹闭数秒。观察并记录家兔的运动呼吸曲线,计算呼吸频率并测量强度,分析该因素引起呼吸运动变化的机制; 肺牵张反射对呼吸运动的影响:待呼吸运动平稳后,夹闭气管插管的一侧管,用20 ml 注射器吸入20 ml 空气,在吸气末期通过另一侧管徐徐向肺内注入,观察并记录家兔的运动呼吸曲线,计算呼吸频率并测量及强度。实验后立即打开夹闭的侧管,使呼吸恢复正常。同法,于呼气末期用注射器抽取肺内气体,观察并记录家兔的运动呼吸曲线,计算呼吸频率并测量强度,分析该因素引起呼吸运动变化的机制(注气与抽气的时间仅限于三个呼吸节律的时间,然后立即打开夹闭的侧管); 观察过程中的注意事项 用生理盐水湿润过的纱布盖住颈部手术部位; 连接张力传感器时确定家兔以完全麻醉,否则家兔的剧烈挣扎易损坏张力传感器; 每一项实验前,要待家兔已经恢复正常呼吸后才能开始,并且描记一段正常的呼吸曲线作为对照。每项实验观察时间不宜过长,出现效应后应立即去掉刺激因素。 思考题 除了本实验中的因素,还有哪些因素会影响动物的呼吸运动?请列举2个因素并阐述其影响机制。
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