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2.2.1动物细胞培养和核移植技术导学案
2.2 动物细胞工程
2.2.1动物细胞培养和核移植技术导学案
【学习目标】
简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。
【重点难点】
重点
动物细胞培养的过程及条件。
用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
难点
用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
【学习过程】
动物细胞工程常用的技术手段有 、 、 、 等, 其中 是其他动物细胞工程技术的基础。
1.动物细胞培养
(1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的 ,将它分散成 ,然后放在适宜的 中,让这些细胞 。
(2)原理:
(3)过程:
取动物组织块→剪碎→用 酶处理分散成 (保证营养供应和有害代谢产物的及时排出)→制成 →转入培养瓶中在适宜环境中进行培养,悬液中分散的细胞很快就 ,称为 。当贴壁细胞分裂生长到 时,细胞就会 ,这种现象称为 初次培养称为 。→贴满瓶壁的细胞重新用 酶处理分散成单个细胞继续培养(使细胞从瓶壁上脱离下来便于分瓶后继续培养),称为 。
初次培养称为 ,分瓶后的培养都称为 。传代培养的细胞一般传至 以后就不易传下去了,能传代培养到50代之前的称为 ,遗传物质 ,能传代培养到50代之后的称为 ,遗传物质 ,已经成为 ,能 。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内,以保持细胞正常的二倍体核型。(正常细胞有接触抑制,通常是 层贴壁,癌细胞能无限增殖,没有接触抑制,可多层贴壁。)
注: 取材时一般选取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,因为这些细胞分化程度低、增殖能力强,更容易培养。
(4)动物细胞培养的条件
① :培养液和所有培养用具应进行 处理。通常还要在培养液添
加一定量的 ,以防培养过程中的污染。此外,还应定期更换培养液,
防止 。
② :合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入 等天然成分。
③ :适宜温度:哺乳动物多是 ;适宜pH: 。
④ : O2是 所必需的,CO2的主要作用是 。
细胞培养时,通常将其置于含 的混合气体培养箱中进行培养。
(5)动物细胞培养技术的应用:
①许多有重要价值的生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等,都可以借助动物细胞的大规模培养来生产。②动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞。③用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性。④科学家培养正常或者病变的细胞,用于生理、病理、药理等方面的研究,如用于筛选抗癌药物等。
[问题]如何保证无菌、无毒环境?
(1)对 和所有 进行无菌处理;
(2)通常还需要在细胞培养液中添加一定量的 ;
(3)应定期更换 ,以便清除 ,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?
为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?用胃蛋白酶行吗?
动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?
动物细胞培养瓶内表面为什么要光滑?
动物细胞培养瓶内表面无毒、无菌的操作方法是什么?
动物细胞培养中氧气和二氧化碳作用分别是什么?
2.动物体细胞核移植技术和克隆动物
(1)概念:将动物的一个细胞的 ,移入一个已经 中,使其重组并发育成一个新的 ,这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为 。哺乳动物核移植可以分为
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