生物监测技术汇总.ppt

生物监测技术 菏泽市立医院消毒供应中心吴洪涛2015.3 引子 生物监测要求 根据09年规范要求灭菌设备均应做生物监测，并规定了生物监测的周期及菌种 灭菌设备 菌种 周期 压力蒸汽灭菌器 嗜热脂肪杆菌芽孢 每周 干热灭菌 枯草杆菌黑色变种芽孢 每周 过氧化氢低温等离子灭菌 嗜热脂肪杆菌芽孢 每天 环氧乙烷灭菌 枯草杆菌黑色变种芽孢 每次 低温甲醛蒸汽灭菌 嗜热脂肪杆菌芽孢 每周 认识生物指示剂 生物指示剂定义 生物指示剂是一类特殊的活微生物制品，可用于确认灭菌设备的性能，灭菌程序的验证，生产过程灭菌效果的监控等。 认识生物指示剂 生物指示剂分类 1).按结构分可分为片状生物指示剂和自含式生物指示剂： 片状生物指示剂需要使用阳性对照和阴性对照，而自含式生物指示剂只需要阳性对照即可。 2）根据灭菌方式的分类（ISO 11138 -1(2006)）： 目前的生物指示剂有环氧乙烷灭菌用生物指示物、湿热灭菌用生物指示物、干热灭菌用生物指示物、过氧化氢低温等离子灭菌生物指示物和甲醛灭菌用生物指示物。 认识生物指示剂 生物指示剂分类 3）按培养时间可分为： 通用型生物指示剂和快速型生物指示剂。通用型生物指示剂根据芽孢复苏后指示菌种新陈代谢引起培养液pH值改变，通过酸碱指示剂变色来进行判读，时间一般在24或48小时以上；而快速型生物指示剂根据芽孢复苏后的酶促反应，通过荧光进行判读，时间一般为3-4小时。同时国外正在研发更加快速的生物指示剂，有望在1小时之内得出结果 多种多样 自含式生物指示剂 定义：是一种自带培养液的生物指示剂，将菌片与装有培养液的小玻璃安瓿同放在一塑料软管中，软管顶端有滤纸封好的通气孔，灭菌后压碎安瓿，培养液与菌片混合之后培养观察。 优点:自含式生物指示剂使用方便，具有无需无菌移种和无菌配制培养基、可避免假阳性结果、且培养时间短等优点，在医疗卫生及工业领域应用广泛。 自含式生物指示剂的结构 灭菌指示条 自含式生物指示剂的使用方法 自含式生物指示剂的作用原理 如果本次灭菌处理不完全，残存的芽孢遇到培养液（含pH指示药）则繁殖，代谢成酸，pH值降低，培养液颜色由紫红色变成黄色。如果灭菌处理完全，芽孢全部死灭，培养液颜色保持紫红色不变。 我们都知道，低温等离子灭菌的生物监测与高温蒸汽灭菌的生物监测同为嗜热脂肪杆菌芽孢自含式生物试剂，但又不能通用。 为什么？ 高、低温生物指示剂的区别 两种指示剂结构、原理、使用方式均一致，那么我们来看一下细小的差别。 1.滤纸 2.细菌数量 3.灭菌指示条 4.制作菌片的基值不同 5.制作工艺也不同 1.滤纸 高温指示剂滤纸为PET透析纸，该滤纸可通过蒸汽和气体不通微生物，完全适用于压力蒸汽灭菌。低温等离子不能灭菌该材料物品。 低温等离子指示剂滤纸为Tyvek（聚乙烯）材料，该材料适用于低温等离子灭菌，但不适用于高压蒸汽灭菌 2.细菌数量 低温等离子 高压蒸汽 每个厂家都 有差异，但低温 的含菌量都会少于 高温的