酶化学教学课件.pptVIP

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酶的比活力 酶的比活力(specific activity)定义: 每毫克酶蛋白所含的酶活力单位数。 单位:u/mg pr 实质:比活力是表示酶制剂纯度的一个指标。比活力愈高,表明酶愈纯。 返回 6.4 酶的作用机制及药物分子的设计 返回 酶促反应的本质 酶的作用机制 药物分子设计 酶的制备及纯化 原则:防止一切使酶蛋白变性失活的因素,在制备过程中测酶活性以跟踪酶。 酶提取纯化的方法 破碎细胞 抽提 浓缩:超滤、凝胶过滤、冷冻干燥等 纯化 要检查某一个酶是否存在,一般利用该酶所催化的化学反应特征,将所提取的酶液与它所催化的底物在一定条件下进行反应,如有产物产生,并且一经煮沸此种活性即消失,就可以证明提取液中有此酶的存在。 返回 6.5 酶的多样性 返回 寡聚酶 同工酶 核酶 多功能酶 人工酶 调节酶 固定化酶 寡聚酶 由两个或两个以上,乃至多达数十个亚基组成的酶称为寡聚酶。可分为几种不同的类型: (一)含相同亚基的寡聚酶 糖酵解酶类 亚基数目 亚基分子量 酶分子量 磷酸化酶a 4 92500 370000 己糖激酶 2 26000 52000 磷酸果糖激酶 4 80000 320000 醛羧酶 4 40000 160000 3-磷酸甘油醛脱氢酶 4 35000 140000 烯醇化酶 2 44000 88000 乳酸脱氢酶 4 35000 140000 丙酮酸激酶 4 62500 250000 糖酵解中各种酶的亚基数及分子量 寡聚酶 (二)含不同亚基的寡聚酶 1.双功能寡聚酶 ——如大肠杆菌的色氨酸合成酶 2.含有专一性的、非酶蛋白亚基的寡聚酶 ——如乳糖合成酶 3.具有底物载体亚基的寡聚酶 ——如大肠杆菌的乙酰辅酶A羧化酶 返回 固定化酶 固定化酶又叫不溶酶,是由共价连接到水不溶支持物,如琼脂糖、聚丙烯酰胺上而不破坏活性的一类酶。 固定化酶的优点: 保持着酶的高度专一性及高催化效率,还有类似于离子交换树脂的优点: 有一定的机械强度,使反应过程可以管道化、连续化、自动化 可以充分洗涤,不带进杂质 分离方便,可反复使用 稳定性大为提高,可较长期使用或贮藏 返回 6.6 酶的应用 蛋白酶 淀粉酶 脂肪酶 纤维素酶 返回 蛋白酶 蛋白酶的分类 按酶来源 动物蛋白酶 植物蛋白酶 微生物蛋白酶 按蛋白酶作用的最适pH 酸性蛋白酶 中性蛋白酶 碱性蛋白酶 蛋白酶 蛋白酶的应用 皮革脱毛与软化 加酶洗涤剂 生丝脱胶与羊毛染色 食品工业 酶法治疗 酶水解了毛根部的毛囊蛋白而使毛松动脱落。蛋白酶分解皮纤维间质中的可溶性蛋白质,使皮纤维进一步松散软化。 加速蛋白质的分解, 提高洗涤效果 蛋白酶处理(去除羊毛表面鳞垢),使染色温度降低,提高染色率。 消炎剂、助消化剂 返回 淀粉酶 根据水解淀粉方式的不同,主要的淀粉酶可分为四大类: α-淀粉酶 β-淀粉酶 葡萄糖淀粉酶(糖化酶) 异淀粉酶 α-淀粉酶 能迅速切开α-1,4糖苷键,但不能切开支链淀粉分支点的α-1,6糖苷键及其附近的α-1,4糖苷键。 水解产物中残留具有α-1,6键的极限糊精和含多个葡萄糖残基的带α-1,6键的低聚糖。 α-淀粉酶主要用于淀粉糊化(如在葡萄糖、酒精生产中)和织物退浆等。 β-淀粉酶 可从淀粉的α-1,4糖苷键的非还原性末端顺次切下麦芽糖单位,遇到α-1,6糖苷键的分支点,则停止不前。 直链部分则生成麦芽糖,而分支点附近及内侧因不能被分解而残留下来,其分解产物为麦芽糖及大分子β-极限糊精。 β-淀粉酶主要用于麦芽糖生产。 葡萄糖淀粉酶 葡萄糖淀粉酶的底物专一性很低,既能切开α-1,4糖苷键,又能切开分支的α-1,6糖苷键,几乎100%转变成葡萄糖。 广泛应用于酿酒、制糖等工业,是重要的酶制剂。 异淀粉酶 专一性切开支链淀粉和糖原等分支点的α-1,6糖苷键,剪下整个侧支,形成长短不一的直链淀粉。 将该酶与其它淀粉酶配合使用时,可使淀粉糖化完全。 返回 脂肪酶 将脂肪水解成脂肪酸和甘油 在非水或低水介质中催化脂肪的合成 生理功能 外源脂肪同化是需经过起消化作用的脂肪酶分解后才能透过细胞膜 有机体内脂肪的储存和动用 食品工业的应用 返回 纤维素酶 纤维素酶是降解纤维素生成葡萄糖的一组酶的总称,它不是单种酶,而是起协同作用的多组分酶系。 农副产品中纤维素资源极其丰富。 开展利用纤维素酶分解纤维素,使之转化为人类需要的物质,利用纤维素酶的催化反应代替高温高压的化学反应,节粮代粮,降低成本和革新工艺的研究意义重大。 返回 某酶的Km为2.4×10-4mol/L,在底物浓度为0.05mol/L时,该酶的反应速度为128μm/min,求在底物浓度为6.3×10-3mol/L、?1×10-4mol/L时,该酶的反应速度分别是多少?

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