第十三章 转录第二部分 陈欢.pptVIP

二、真核生物的转录 1.染色质和核小体结构对转录有深刻的影响 2.真核细胞RNA聚合酶高度分工 3.启动子以外的序列（顺式作用元件）参与调节基因的转录 4.转录还需要许多被称为转录因子的蛋白质的参与 5.转录与翻译不存在偶联关系 6.转录的产物多为单顺反子，而原核基因的转录产物多为多顺反子 增强子和沉默子 增强子（enhancer）：是一种能够大幅度增强基因转录效率的顺式作用元件。 沉默子（silencer）：与增强子相反，是一种阻止基因表达的顺式作用元件。 作用特性：与启动子不同，其作用与距离、方向和位置均无关；对临近的基因作用最强；某些增强子或沉默子具有组织特异性。 增强子和沉默子的作用特性 （三）转录因子（transcript factor,TF） 反式作用因子：是能直接或间接地识别或结合各种顺式作用元件，参与调控基因转录的蛋白质。顺式作用元件必须由反式作用因子与之结合后才能对转录起调控作用。 转录因子：真核RNA聚合酶不能识别DNA上的启动子，识别这些启动子序列的反式作用因子称为转录因子。 转录因子在转录中主要有两大基本功能：一是作为装配因子或定向因子识别和结合核心启动子，招募RNA聚合酶正确地与启动子结合；其次是调节RNA聚合酶的活性 5’端加帽： 5?端 帽子结构的功能 提高mRNA的稳定性 参与识别起始密码子的过程，提高mRNA的可翻译性 有助于mRNA通过核孔从细胞核运输到细胞质 提高剪接反应的效率。 剪接过程中的两次转酯反应 核酶的发现，对中心法则作了重要补充； 核酶的发现是对传统酶学的挑战； 利用核酶的结构设计合成人工核酶； 生命的起源：“RNA世界”？ 本章小结 DNA转录的一般特征 RNA聚合酶及抑制剂 原核细胞mRNA转录过程 真核细胞mRNA转录过程 真核细胞m RNA转录后加工 ② ③ UACUACA - AG UG U4 U5 U6 E1 E2 U1 U2 UACUACA - AG UG U6 E1 E2 U1、U4 无活性的剪接体 U5 激活的剪接体 二、真核细胞tRNA的转录后加工 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA 目 录 RNAaseP（外切酶）、内切酶 目 录 1.剪切和修剪：核糖核酸酶催化 tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ATP ADP 目 录 2. 添加CCA 3.碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 目 录 4.酵母Pre-tRNA 的剪接 真核细胞Pre-RNA具有小的内含子 三、真核细胞rRNA 前体的后加工 1)剪切、修剪和修饰 2)剪接 （某些真核生物，如四膜虫） 四膜虫rRNA内含子的二级结构 1.四膜虫rRNA的剪接采用自我剪接方式 5′-端核苷酸序列 四、核 酶 最简单的核酶二级结构——锤头状结构 (hammerhead structure) 通常为60个核苷酸左右 同一分子上包括有催化部份和底物部份 催化部份和底物部份组成锤头结构 除rRNA外，tRNA、mRNA的加工也可采用自我剪接方式。 2.核酶：具有催化性质的RNA 底物部分 3.核酶研究的意义 * * * * （一）真核生物的转录系统的特点 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 启动子 结构基因 -GCGC---CAAT---TATA 转录起始 （二）顺式作用元件 顺式作用元件：同一DNA分子中具有转录调节功能的特异DNA序列。包括启动子，增强子、沉默子和调控元件等。 真核细胞RNA polⅡ启动子性质 增强子作用的环出模型 参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ TF Ⅱ H 57 （ a ） （ ） TF Ⅱ E 与RNA-polⅡ结合，解螺旋酶 30 ， 74 TF Ⅱ F 促进 RNA - pol Ⅱ 结合及作 为其他因子结合的桥梁 33 TF Ⅱ B 稳定TFⅡD与启动子的结合 12 ， 19 ， 35 TF Ⅱ A 辅助 TBP - DNA 结合 TAF** 结合 TATA 盒 TBP* 38 TF Ⅱ D 功 能 亚基组成，分子量 ( kD ) 转录因子 ATPase,解螺旋酶和CTD激酶活性 促进启动子的解链和清空 TF Ⅱ H 与RNA-polⅡ结合，协助招募TFⅡH， 激活TFⅡH，促进启动子解链 57 （ a ） TF Ⅱ E 30 ， 74 TF Ⅱ F 促进 RNA - pol 结合及作 为其他因子结合的桥梁 33 TF Ⅱ B 12 ， 19 ， 35 TF Ⅱ A 辅助 - DN