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实验六 观察血清中谷丙转氨酶的活力变化 Experiment 6 Observing Enzyme Activity Changes of Alanine Aminotransferase in Sample 一、目的要求 1、了解血清谷丙转氨酶活力变化的意义 2、掌握血清谷丙转氨酶活力的测定方法 二、相关知识点 1. 转氨作用 transamination 2. 氨基转移酶 转氨酶（aminotransferase，transaminase） 催化氨基酸与酮酸之间氨基转移的一类酶 谷丙转氨酶 glutaimc-pyrivic transminase GPT 又称丙氨酸转氨酶alanine aminotransferase ALT 谷草转氨酶 glutamic oxaloacetic transaminase GOT 又称天冬氨酸转氨酶 aspartate transaminase, AST 3.转氨作用的机制： 4．转氨作用的意义 正常时转氨酶主要分布在细胞内，血清中酶活力很低 GOT以心脏细胞中活力最大，其次为肝脏细胞 GPT则以肝脏细胞中活力最大 5.谷丙转氨酶的临床意义 如果GDP血清值超过正常上限2－3倍，并持续两周以上，表明有肝胆疾病存在的可能。 ALT的正常上限是40单位，2.5倍为100单位，20倍为800单位。 三、实验原理 SALT单位的定义是：1ml 血清在37℃与底物作用30min，每产生2.5μg丙酮酸所需酶的量为一个SALT单位。 四、实验操作 1.标准曲线的绘制 2． SALT活力测定：洁净干燥试管4支，即测定管、对照管各2支 五、注意事项 1. 2，4-二硝基苯肼可与有酮基的化合物作用形成苯腙 2. 吸量应准确，严格控制反应时间和温度。 3. 在测定SALT活力时，应事先将底物、血清在37℃水浴中恒温 4. 溶血标本不宜采用，因血细胞内转氨酶活力较高，影响测定结果。 5．在测定时，如酶活力较大（大于100单位），应将样品稀释后再进行测定。 六、专业词汇 glutaimc-pyrivic transminase GPT alanine aminotransferase ALT glutamic oxaloacetic transaminase GOT aspartate transaminase, AST enzyme activity serum Aminotransferase/ transaminase catalyze alanine α-ketoglutarate glutamic acid pyruvic acid alkali substrate ABSTRACT Observing Enzyme Activity Changes of Alanine Aminotransferase in Sample Abstract: Objetcive: To determine the activity of serum ALT in sample. Method: SALT was measured by Reitman-Frankel colorimetric end point method Results: The normal SALT activity is ( ) unit, the abnormal SALT activity is ( ) unit. Conclusion: The activity of SALT in abnormal sample is much higher than that in normal sample Key Words: alanine aminotransferase， aspartate transaminase, enzyme activity, serum, α-ketoglutarate, substrate, （1）draw calibration curve （2）determining the activity of SALT * * 异常组织 正常组织 GOT升高 GOT/GPT 升高 GOT低 GOT/GPT低 血清中酶活力 细胞破损酶溢出 GOT高 GOT/GPT高 细胞中酶活力 心脏 肝脏 心脏 肝脏 SUBSTRACT Pyruvate dinitrate phenylhydrazone 2,