补肾方对激素性股骨头坏死大鼠的骨修复作用.docVIP

中国中医药研究促进会交稿 补肾方对激素性股骨头坏死大鼠的作用 刘春芳 ，姜宜妮 ，林 娜1陈卫衡* 中国中医科学院中药研究所，北京 100700；. 中国中医科学院望京医院，北京 100102） [摘要] 目的：观察补肾方对激素性股骨头坏死SONFH )大鼠股骨头骨修复的作用。方法：单纯性糖皮质激素股骨头坏死模型5.3 、10.6 21.2 g·kg-1的补肾方和 .68 g·kg-1 健骨生丸6周后取血和股骨头，HE 染色观察股骨头组织病理学改变，Micro-CT扫描观察股骨头骨形态变化并进行骨计量学分析，股骨头血管造影Micro-CT扫描观察股骨头变化，旋转法酶速率法检测血清含量，ELISA 检测血清标志物骨钙素BGP )和降钙素 CT )含量。结果：10.6 21.2 g·kg-1剂量的补肾方明显SONFH大鼠股骨头骨小梁、骨髓腔坏死、脂肪细胞增多变大等BV/TV、Tb.Th、Tb.Pf、Tb.N、BMDTb.Sp，增加股骨头内全血低切、中切值血浆粘度TG、TC、LDL和ApoA1HDL、ApoA1、BGP 和 CT 10.6 g·kg-1剂量组的作用与健骨生丸结论：明显SONFH 大鼠股骨头组织病理学。 [关键词] 激素性股骨头坏死；补肾方；骨组织；骨计量；骨钙素；降钙素 激素性股骨头坏死(SONFH )是指因大剂量或长期使用激素而引起股骨头骨组织死亡的病理过程，其中骨坏死和骨修复与重建相伴发生[]。中医将股骨头坏死归属于骨痹、骨蚀、骨痿范畴，认为激素性股骨头坏死是药毒损肾蚀骨的结果，患者多表现肾虚[2]，常采用补肾生髓、舒筋活络等方法进行治疗，取得一定疗效。补肾方具有补肾壮骨、活血通络功效是笔者治疗股骨头坏死的临床经验方[3]。为了进一步其作用机制，本研究拟采用大鼠臀肌注射大剂量激素以造成实验性SONFH模型观察补肾方对股骨头坏死骨修复的影响，为临床的合理应用提供参考。 雄性 Wistar 大鼠随机分正常组、模型组、补肾方、中、低剂量组 5.3 、10.6 21.2 g·kg-1）和阳性对照药健骨生丸组.68 g·kg-1)。除正常组外其余各组臀肌注射 21 mg·kg-1 甲泼尼龙琥珀酸钠，一天一次，连续 3 天，建立单纯性糖皮质激素股骨头坏死模型。各给药组从第 4 d 开始，分别给予 5.3 、10.6 21.2 g·kg-1的补肾方和 .68 g·kg-1 健骨生丸，给药 6 周后取血和股骨头，HE 染色观察股骨头组织的病理学改变，Micro-CT 扫描观察股骨头骨形态变化并进行骨计量学分析，股骨头血管造影Micro-CT扫描观察股骨头变化，旋转法全血低切、中切值血浆粘度检测酶速率法检测血清甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)的含量，ELISA 检测血清标志物骨钙素BGP )和降钙素 CT )含量。 2.1 对股骨头组织病理改变的影响 组织病理形态学观察模型组股骨头部分软骨细胞排列不整齐骨小梁变窄或断裂骨细胞内可见大量空骨陷窝和核固缩脂肪细胞明显增多变大补肾方高剂量组股骨头软骨细胞规则尚整齐骨小梁宽度较正常，未见明显断裂，骨细胞内有少量空骨陷窝，脂肪细胞面积和直径均明显低于模型组健骨生丸组股骨头软骨细胞规则尚整齐骨小梁宽度较正常，骨细胞内有少量空骨陷窝，脂肪细胞面积和直径均明显低于模型组。 组织病理形态学半定量分析如表 1 所示，模型组空骨陷窝率、脂肪细胞面积和直径正常组均显著升高高、中剂量补肾方骨陷窝率、脂肪细胞面积和直径显著降低补肾方低剂量能明显降低脂肪细胞面积健骨生丸骨陷窝率、脂肪细胞面积和直径显著降低补肾方中剂量组相。 图1 补肾方对SONFH大鼠股骨头病理改变的影响HE，×200 ) 注：A．Control；B. Model；C. BS 21.2g/kg；D. JGS 1.68g/kg 表1补肾方对 SONFH 大鼠股骨头组织病理形态学半定量分析的影响(x±s，n=10 组别 剂量 /g·kg-1） 空骨陷窝率 /% 脂肪细胞面积 /um2 脂肪细胞直径 /um ontrol Model BS JGS － － 5.3 10.6 21.2 16.7±4.7 42.3±3.2### 29.1±9.5 22.3±9.3* 18.1±7.6** 21.0±3.6* 142.0±25.5 477.7±44.8### 424.6±63.1* 387.5±92.3** 217.3±65.6*** 346.4±88.6** 21.7±2.1 57±6.1### 48.2±9.7 40.3±9.3* 22.3±55*** 37.1±7.6** 注：与相比，##P0.0##