第七章微生物的遗传与变异2解答.ppt

* 用于检测食品、饮料、药物和饮水等样品的中致癌物 * 设计和采用效率高的筛选方案和方法: 一般通过初筛与复筛两种方法对突变株进行生产性能的测定。 初筛既可在培养皿平板上进行，也可在摇瓶中进行，两者各有利弊。 复筛是对突变株的生产性能作比较精确的定量测定。一般是将微生物摇瓶培养，然后再对培养液进行分析测定。 不仅需要设计效率更高的筛选方法，还应努力推广筛选操作的自动化和电子计算机化。 * 在实际工作中，一般认为应采用把筛选工程氛围初筛与复筛两个阶段的筛选方案为好。前者以量（选留菌株的数量）为主，后者以质（测定数据的精确度）为主。例如，在工作量限度为200只摇瓶的具体条件下，为了取得更大的工效，有人提出了以下的筛选方案 * 利用和创造形态、生理与产量间的相关指标 为了确切某一突变株产量性状的提高程度，必须进行大量的分析测定和统计工作，而一些形态变异虽能直接和迅速地加以观察，但又不一定与产量变异相关。如果能找到这两者间的相关性，则育种时初筛的效率就可大大提高。如在灰黄霉素产生菌荨麻青霉的育种中，发现菌落的棕红颜色变深者，产量往往有所提高； 形态、生理与代谢产物产量间的相关性常常可通过人们的努力而加以改造。利用鉴别性培养基的原理或其它方法就可有效地把原来肉眼所观察不到的生理性状或产量性状转化为可见的“形态”性状。例如，在琼脂平板上，通过蛋白酶水解圈的大小、淀粉酶变色圈的大小，抗生素抑制圈的大小，生长因子周围某菌生长圈的大小，以及外毒素的沉淀反应圈的大小等，都可用于初筛工作中估计某菌产生相应代谢产物能力的“形态”指标。 初筛： 平板上做定性、半定量的测定，观察突变株 的生理效应范围。例如：筛抗性菌株，可采用梯度平板法；  筛淀粉酶产生菌株等透明圈法； 复筛：较精确的生物化学分析方法 做摇瓶测定   * 野生型：从自然界分离到的任何微生物在其发生营养缺陷突变前的原始菌株。 营养缺陷型：野生型菌株经诱变处理后，丧失了某酶的合成能力，只能在加有该酶合成产物的培养基中生长，这类突变称为营养缺陷型突变株（简称营养缺陷型）。 原养型：营养缺陷型突变经回变或重组后产生的菌株，营养要求在表型上与野生型相同。 * 即淘汰野生型 例：青霉素法，适合于细菌。 青霉素能抑制细菌细胞壁的合成，能杀死生长着的细菌，对休止态细胞无作用。 * 基因重组是生物体在未发生突变的情况下，产生新的遗传型个体的现象。杂交： 是遗传类型不同的个体相互交配或结合，产生杂种的过程。 * 定义：受体菌直接吸收来自供体菌的DNA片段而获得部分新的遗传性状的现象，称为转化。接受了供体菌DNA的受体菌称为转化子（transformant）。 过程：受体菌吸收了来自供体菌的DNA片段，通过交换，把它整合到自己的基因组中，再经复制就使自己变成一个转化子。 抑制剂：脱氧核糖核酸酶 意义：现代生物学发展史上的一个里程碑，促进了分子生物学的建立和发展 2、转化 受体菌直接吸收来自供体菌的DNA片段，通过交换，将其整合到自己的基因组中，再经复制就使自己变成一个转化子。 这种受体菌接受供体菌的DNA片段而获得部分新的遗传性状的现象，称转化或转化作用。 转化的条件: ①两菌株的亲缘关系应接近 ②受体细胞要处于感受态。 ③供体DNA片段大小适宜，分子量小于1× 107 D ④环境条件 在R型活菌的协助下， S型死菌死灰复燃 * 转化或转化作用：受体菌（recipient或receptor）直接吸收了来自供体菌（donor）的DNA片段，通过交换整合到自己的基因组中，从而获得部分新的遗传型状的现象。接受了供体菌DNA的受体菌称为转化子（transformant）。 范围：原核生物中，转化是一个较普遍的现象。 若干放线菌和蓝细菌及少数真核微生物也有转化报道。 转化发生的条件 两个菌种或菌株之间能否发生转化，与它们在进化过程中的亲缘关系有着密切的关系。但即使在转化率极高的那些种中，其不同菌株间也不一定都可发生转化。 进行转化的受体细胞必须处于感受态（competence），亦即受体细胞最易接受外源DNA片段并实现其转化的一种生理状态。 感受态因子：细胞外蛋白，可催化外来DNA分子的吸收或降解细胞表面某种成分，以让细胞表面的DNA受体显露出来；也可能是一种自溶酶。对不同细菌，每个细胞上的DNA结合位点数不同。 转化因子的本质一般是DNA，经多次提纯操作后，每一转化DNA片段的分子量都小于1×107，约占细菌核染色体组的0.3%。据研究，呈质粒形式的转化因子，其转化频率最高；一般的转化因子都是线状双链DNA；也有线状单链DNA具有转化作用的报道。 （2）环