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WesternBlot五年体会 western blot五年体会——“穷人的劳斯莱斯” 2010-09-28 10:04 来源：丁香园 点击次数：1602 关键词： western blot 蛋白检测 题记：本文转载自丁香园论坛热贴：“穷人的劳斯莱斯”，作者seagate分享了他在从2005年第一次见到抗体到2010年间五年western blot的实验经历。五年里，太多的磨难，太多的惊喜，太多的感触，太多的代价，让seagate对于western blot实验有了独到深刻的见识。因为论坛排版不佳，转载全文至此，以飨各位网友。再次向丁香园网友seagate致以诚挚的谢意。 1、抗体的选择 　对于国内的大多数实验室来讲，做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很简单，买进口抗体捉襟见肘，买国产抗体得需要大无畏的勇气，对于我所在的兰州地区的实验者而言，感触尤深。在这五年的western blot实验历程里，我先后用过进口抗体，进口抗体国内分装包装，国产抗体，质量良莠不齐。 　进口抗体一般不会出现闪失：abcam品种全，质量过硬，但价高（3400元/100微升），而且说是100微升，但至多能吸出来90微升；Sigma的价最贵；比较有性价比的是CST的抗体，现在好像是2200元/100微升，我前后用过二十几种， 1:1000的稀释比下，还没有失过