酶联免疫斑点法在轮状病毒检测及轮状病毒中与试验中的应用.pdfVIP

摘要快速、高效轮状病毒及轮状病毒中和抗体的检测法一．酶联免疫斑点法，该方法轮状病毒是引起小儿腹泻的主因。全球每年有超过???谟び锥?剐菏怯?轮状病毒引起的，并造成超过?万婴幼儿的死亡，且大部分死亡病例都发生在不发达的亚非国家。针对轮状病毒的治疗目前还没有特别有效的治疗药物，因此力和轮状病毒中和抗体的方法，但由于???ê氖背ぁ⒅鞴畚蟛畲蟆⒐ぷ髁?大等原因，限制其在大规模的筛选和试验中应用。因此建立一种快速、高效、准确的轮状病毒和轮状病毒中和抗体的检测方法对轮状病毒的病毒学研究和轮状病毒疫苗的开发都具有重要的作用和意义。本论文建立了轮状病毒的分离，鉴定和扩大培养的方式，通过收集和分离培养不同的轮状病毒为以后的轮状病毒病毒学研究做准备。同时建立了一种新型的结构蛋白??奶匾煨悦副昕固???蚔?的特异性反应，通过??陨ǚ?应以区别感染和未感染细胞来实现检测的；在本论文中还从可靠性，稳定性等方酶联免疫斑点法不仅具有快速、可靠、准确等特点，而且还和传统的????测法具有很好的相关性。新建立的轮状病毒酶联免疫斑点法不仅可以用于轮状病毒中和抗体的检测还可以用于轮状病毒感染力的检测，同时在该论文中我们还以新建立的轮状病毒酶联免疫斑点法建立了轮状病毒中和抗体的筛选方法，同时还利用该方法对普通人群血清中中和抗体进行分析和轮状病毒中和抗体的筛选。关键词：轮状病毒；酶联免疫斑点检测法；中和抗体筛选预防轮状病毒就显得至关重要；而预防轮状病毒最有效的方法就是研制轮状病毒疫苗，因此研制安全、广谱、高效的轮状病毒疫苗就成为当今各国政府及世界卫生组织????V匾5娜挝瘛Ｄ壳癟???ㄊ浅Ｓ玫募觳饴肿床《靖腥?是以酶联免疫斑点法和????远???枰俏;?。?柚?攵哉攵月肿床《?面对建立的轮状病毒酶联免疫斑点法进行验证，通过对比发现新建立的轮状病毒?? 秈???籲??协???枷?????鰀?曲??蛐??鷆??觚???????鸷黶?緊??“?????时?????鷇“????祄????????肋?????甌????????鶷??????畂???躷?????????切???．?????琻??弛??????????，????蕁?鷇????锄????＆???誶??，????柚?肌????锄?鷄?，?????????鷗?????印???????????簉????籈???；??寡猤?????邪??’??????????????????．?????．?切??．???????皐嬲???鴌??????礶?????．????鴅嬲?????．?廿????琱????緀??：????????．?????—???】【?????????????瑆?????瓸???，????琣????培??阛????????辏畁?譽????．???????甌???．?????阛???郺???????阛??冯?????? 挪?蟨????????鷌?缩略词???．???曲??????????Ｏ蒫??英文缩写加印???氨基酸氨苄青霉素碱基对碳酸缓冲液致细胞病变效应细胞毒性?馨拖赴?双层病毒颗粒双链核糖核酸?觚???辣根过氧化物酶卡那霉素非结构蛋白轮状病毒英文全称鼢?冲?????中文名核心颗粒二乙胺四乙酸酶联免疫吸附法免疫球蛋白千道尔顿信使核糖核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳Ⅸ????????????遲?眔??????．???????????????????????????．???～??打??—?????．????仃???????塔??仃????? 嘶?????????阛??邱?????醋B季酆厦噶词椒从????类病毒颗粒半数组织感染剂量三层病毒颗粒?餺??三角划分值Ⅵ?·??Ⅵ?病毒蛋白缩略词??????鎍????????????????? 把?直径约为?姗，表面光滑，具有感染性；缺失最外层衣壳的双层轮状病毒颗粒??轮状病毒性状节的双链?軦?????谒拗飨赴??诟粗疲宦肿床《就饷媪讲阋驴蔷??小儿腹泻是儿童的常见和多发病。据世界卫生组织???谋ǜ嫦允荆?每年全球大约有????万婴幼儿死于腹泻相关的疾病或并发症【?浚?渲新肿?次在腹泻小鼠的肠组织切片中观察到轮状病毒颗粒【??】，由于其类似车轮状的结构而被命名为轮状病毒???????；人的轮状病毒是在??被澳大利亚学者???发现的【?縪自从轮状病毒被发现以来，人们对轮状病毒的结构、流行病学特征、致病机理、感染复制机制及免疫保护机制进行了大量研究，为轮状病毒的预防及治疗提供了大量的理论支持。目前由于轮状病毒尚未有特别有效的治疗药，因此研制疫苗对预防轮状病毒引起的腹泻具有重要的意义，目前有?遲?????，??簒?鹄妓厥房?及罗特威?贾萆?镏破费芯克?三种轮状病毒疫苗已经上市，且都具有较好的免疫保护效果。轮状病毒??属于呼肠孤病毒??????科，轮状病毒属，是一种无包膜病毒【?浚和暾?穆肿床《