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选修一生物技术实践
高三生物组
知识点一、传统发酵技术的应用
1、几种常用发酵菌种的比较
菌种
项目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧异养需氧异养需氧异养厌氧繁殖方式适宜条件下出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖生产应用酿酒酿醋制作腐乳制作泡菜发酵条件前期需氧,后期不需氧一直需氧一直需氧不需氧2、果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌种及控制条件的比较
制作内容比较项目 果酒果醋腐乳泡菜所用菌种酵母菌醋酸菌主要是为霉乳酸菌控制条件O2的有无无氧有氧有氧无氧最适温度18℃~25℃30℃~35℃15℃~18℃常温时间控制10~12天7~8天腌制8天左右腌制10天左右其他条件封闭充气口适时充气控制盐酒用量控制盐水比例相关反应式见下面?
3、果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程的比较及亚硝酸盐含量的检测
比较项目果酒和果醋制作腐乳的制作制作泡菜并检测亚硝酸盐含量制作原理果酒:无氧呼吸? 果醋:有氧呼吸多种微生物发酵泡菜制作:乳酸菌无氧呼吸
亚硝酸盐检测:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料实验流程图挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵
↓ ↓
果酒 果醋让豆腐上长也毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制操作提示材料的选择与处理;防止发酵液被污染;控制好发酵条件。控制好材料的用量;防止杂菌污染。泡菜坛的选择;腌制的条件;测定亚硝酸盐含量的操作。知识点二、微生物的实验室培养要点解读
(1)培养基的主要种类
划分标准培养基种类特点用途物理性质[来源:学科网][来源:学+科+网Z+X+X+K][来源:Zxxk.Com]液体培养基[来源:学科网ZXXK][来源:学科网ZXXK][来源:学科网]不加凝固剂[来源:学.科.网Z.X.X.K][来源:学.科.网Z.X.X.K][来源:学科网]工业生产[来源:学科网ZXXK]半固体培养基加凝固剂,如琼脂观察微生物的运动、分类鉴定固体培养基微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种用途选择培养基培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物鉴别培养基根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物(2)培养基的营养成分
营养要素来源碳源无机碳源CO2、NaHCO3等含碳无机物有机碳源糖、脂、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等氮源无机氮源无机氮、NH3、铵盐、硝酸盐、N2等有机氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸生长因子维生素、氨基酸、碱基提示:培养基的营养要素除了碳源、氮源和生长因子外,还有水、无机盐以及不同微生物生长对pH以及氧气的需求。
(3)消毒和灭菌的区别
条件结果常用的方法应用的范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物质表面或内部一部分对人体有害的微生物煮沸消毒法一般物品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源等灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子灼烧灭菌接种工具干热灭菌玻璃器皿、金属工具高压蒸汽灭菌培养基及容器的灭菌(4)纯化大肠杆菌的原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
知识点三、酵母细胞的固定化
(1)实验原理:①固定化酶不溶于反应液中,易于回收,可以重复使用。②固定化酶和固定化细胞是利用物理和化学方法将酶或细胞固定于一定空间内的技术。
常用方法
包埋法:适合于较大的细胞
适用于酶的固定
化学结合法
物理吸附法
(2)直接使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较
方法优点缺点直接使用酶催化效率高、耗能低、污染低对环境条件非常敏感、易失活;难回收,成本高,影响产品质量固定化酶既能与反应物接触,又能与产物分离;可以反复利用不利于催化一系列的酶促反应固定化细胞成本低、操作容易反应物不易与酶接近,尤其是大分子物质,反应效率下降(3)制备固定化酵母细胞成功的关键
加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环,如果浓度过高,将很难形成凝胶珠,如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少,都会影响实验
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