1.3.2 植物组织培养2.docVIP

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1.3.2 植物组织培养2

课题 1.3.2植物组织培养2 教学目标:1、知识与技能:1、识记被子植物花粉发育的过程 2、通过学习花药培养的基本技术,培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力???2、过程与方法:1、列表比较花药培养与组织培养 2、选择适宜的培养材料和培养基3、情感态度价值观:1、培养动手实践、勇于探索的科学探究素质 2、通过讨论花药离体培养技术在生产实践中的应用,帮助学生确立理论联系实际的观点教学重点:选取适宜的培养材料和培养基教学难点:选取适宜的培养材料和培养基教学方法:启发式教学教具使用:多媒体课件教学过程教师主导活动学生主体活动课前:安排学生预习:预习提纲(见导学案) 课前检查预习情况。学生根据预习提纲进行自学。课中: 活动1:引导学生对上节存在问题总结。 新授: 1.基础知识 活动2:阅读“被子植物的花粉发育”,回答下列问题: 1.被子植物的花粉是在 中由 经过 分裂形成的。 2.结合教材内容填下列示意图: 小孢子母细胞(2n) ( )时期(n) 单核( )期(n) 双核期 ( )细胞核(n) ( )细胞核(n) ( )细胞(n) ( )细胞(n) ( )个精子(n) ( )分裂 ( )分裂 单核( )期(n) ( )分裂 〖思考2〗由此可见,被子植物的花粉的发育要经历 四分体 时期, 单核 期和 双核 期等阶段。 〖思考3〗在正常情况下,一个小孢子母细胞可以产生 4 个精子;在一枚花药中可以产生 很多 个花粉。 〖思考4〗营养细胞在花粉萌发过程中的作用是什么?控制花粉的萌发并提供营养。 活动3:阅读“产生花粉植株的两条途径”,讨论并回答下列问题: 1.产生花粉植株(即单倍体植株)的两种途径:一是花粉通过 胚状体 阶段发育为植株,二是通过 愈伤组织 阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中 激素 的种类及其 浓度 的配比。 2.填写培育花粉植株的途径图解?? ( ) 花药中 的花粉 ( ) ( ) ( 胚状体 ) ( 愈伤组织 ) ( ) 丛 芽 生 根 移栽 3.胚状体的结构及其发育过程与种子相似,所以把胚状体到从芽的过程称为 分化 ,而把从愈伤组织到从芽的过程称为 再分化 。 活动4:阅读“影响花药培养的因素”,回答下列问题: 1.影响花粉植株的主要因素: 材料的选择 和 培养基的组成 等。 2.材料的选择: ①从花药来看,应当选择(初花期、盛花期、晚花期)的花药; ②从花粉来看,应当选择(四分体期、单核期、双核期、萌发期)的花粉; ③从花蕾来看,应当选择(完全未开放、略微开放、完全盛开)的花蕾。 〖思考5〗除此之外,你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些? 植物的种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件等。 〖思考6〗为什么不选择使用单核期之前或之后的花粉? 单核期之前,花药质地幼嫩,容易破碎;单核期之后,花瓣开始松动,消毒困难。 〖思考7〗花瓣松动会给材料消毒带来困难的原因是 外界环境中的微生物容易侵入到花药中 。 2.实验设计 活动5:阅读“材料的选择”,回答下列问题: 1.选择花药时一般通过 镜检 确定花粉发育时期,此时需要对花粉细胞核进行染色,最常用的染色剂是 醋酸洋红溶液 和 焙花青-铬钒溶液 ,它们分别可以将细胞核染成 红 色和 蓝黑 色。 2.在使用焙花青-铬钒溶液时,需要首先将花药用 卡诺氏固定液 处理20min。该试剂的配制方法是将 无水酒精和冰醋酸 按体积比为 3:1 的比例混合均匀。 活动6:阅读“材料的消毒”,填写下列流程图: 花蕾 (70%酒精) 大约30s (无菌水) 清洗 (无菌吸水纸) 吸干水分 (1%氯化汞溶液) 2~4min (无菌水) 冲洗 〖思考8〗月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较,二者有何不同? 在酒精消毒前,花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。 活动7:阅读“接种和培养”,回答下列问题: 1.剥取花药:消毒后的花蕾,要在 无菌 条件下除去花萼、花瓣。 〖思考9〗剥取花药时,一是注意不要损伤花药,原因是 容易从受伤部位产生愈伤组织 ;二是要彻底除去花丝,原因是 花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成 。 2.接种花药:剥取的花药要立刻接种到 培养基 上。每个培养瓶接种 7~10 个花药。 3.培养:花药培养利用的培养基是 MS 培养基,pH为 5.8 ,温度为 25

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