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湖南农业大学课程论文 学 院：动物医学院 班 级：专硕动医班 姓 名：吕轩 学 号：S课程论文题目：犬瘟热诊断技术的研究进展 评阅成绩： 评阅意见： 成绩评定教师签名： 日期： 2015年 12月 17日 犬瘟热诊断技术的研究进展 学生：吕轩 动物医学院 摘 要:近年来,犬瘟热已严重危害了犬及毛皮动物养殖业的健康发展,快速、准确的诊断技术对于犬瘟热的预防 显得尤为重要。现阶段犬瘟热诊断技术的研究主要有病毒分离培养与镜检观察、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免 疫 组 化 、免 疫 胶 体 金 、核 酸 杂 交 、巢 式 RT-PCR、实 时 荧 光 定 量 RT-PCR、双 重 PCR、基 因 芯 片 、液 相 芯 片 、环 介 导 等 温 扩增等。获得能产生典型细胞病变的易感细胞株是成功进行犬瘟热病毒分离培养与镜检观察的关键。作者就犬 瘟热诊断技术的研究进展作一综述,为有效预防和控制犬瘟热的流行和暴发提供简便、高效的检测技术。 关键词:犬瘟热;诊断技术;研究进展 犬 瘟 热由 犬 瘟 热 病 毒 (canine distemper virus,CDV)感 染 所 致 ,该 病 呈 世 界 性 分 布 ,对 宠 物 犬 和 经 济 毛 皮 动 物 (貂 、狐 、貉 )等 危 害 严 重 , 死 亡 率 可 达 8 0 % ~ 9 0 % ,1 9 9 7 年 的 《 中 华 人民共和国动物防疫法》将其列为三类动物疫病。 近年来,人们对犬瘟热病的研究虽取得很大进展,但 由于该病在感染后多继发细菌性、病毒性感染,早期 诊断困难,且动物一旦发病死亡率高。因此,做好预 防及建立早期快速而准确的检测方法,对控制犬瘟 热的流行意义重大。作者就目前国内外对犬瘟热诊 断技术的研究进展进行综述,以期为该病的防控及 快速诊断技术研究提供参考。 1 病原及流行特点?CDV 为副黏病毒科、麻疹病毒属成员,是有囊 膜 的 单 股 负 链 RNA 病 毒 ,囊 膜 上 的 附 着 蛋 白 (at- 收 稿 日 期 :2014-12-29?基 金 项 目 : 吉 林 省 重 点 科 技 攻 关 项 目 (2 0 1 3 0 2 0 6 0 3 9 N Y )?作 者 简 介 :苏 凤 艳 (1973-),女 ,吉 林 集 安 人 ,博 士 ,研 究 方 向 :经 济 动 物 疾 病 防 治 ,E-mail:sufy110@163.com?* 通 信 作 者 :王 全 凯 (1958-),男 ,吉 林 松 原 人 ,博 士 ,教 授 ,博 士 生 导 师 ,研 究 方 向 :经 济 动 物 疾 病 防 治 ,E-mail163.com 5 期 苏 凤 艳 等 :犬 瘟 热 诊 断 技 术 的 研 究 进 展 1319 tachment protein or hemagglutinin protein,H )和 融 合蛋白(fusion protein,F)在 病 毒 吸 附 和 侵 入 宿 主 细胞过程中起着重要作用。在 CDV 免疫学研究 中,因 H 和F蛋白具有许多病毒中和性抗原表位, 可诱导机体产生中和抗体,常作为合成疫苗和基因 工程亚单位疫苗的研究对象[1-2]。一般常用非洲绿 猴 肾 细 胞 系 (Vero)和 犬 肾 细 胞 系 (MDCK)进 行 CDV 的分离培养、增殖、病变观察、疾病的诊断及疫 苗 的 开 发 等 研 究 [3 -5 ] 。 目前大多数毛皮动物养殖国均有该病的流行,已 成为危害毛皮动物的三大主要传染病(犬瘟热、病毒 性肠炎、阿留申)之一。一般冬春季多发,幼畜最易 感,典型病例表现为体温升高且呈双相热型。但随着 养殖业的发展,大范围易感动物的运输导致 CDV 的 发病规律不再具有季节性、周期性和地域性。 2 病毒分离培养与镜检观察?CDV 的成功分离是进行病原学诊断的基础,也 是确诊该病最可靠的方法,但分离率往往较低,这是 由于用于 CDV 分离的细胞一般不表达 CDV 受 体 [6 -7 ] 。 国 内 外 试 验 结 果 表 明 , 稳 定 表 达 C D V 信 号 淋 巴 激 活 分 子 (S L A M ) 受 体 的 细 胞 株 , 能 有 效 分 离 CDV,并且不受传代次数限制,产生比传代细胞更 明 显 的 细 胞 病 变 (CPE)。 因 此 ,为 了 提 高 C