2009年深圳市福田区福田中学DNA重组技术的基本工具课件.ppt

基因工程;学习目标;青霉菌产生青霉素 根瘤菌固氮 家蚕吐丝;;基因工程的产物;什么叫基因工程？;基因工程的概念;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基础理论和技术发展催生了基因工程;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;基因工程培育抗虫棉的关键步骤：;解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？;（一）限制性核酸内切酶——“分子手术刀”;磷酸二酯键：;磷酸二酯键：;具有特异性。 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子，;限制酶的识别序列：;EcoRI限制酶的切割：;C C C G G G;产生黏性末端或平末端。; 限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线（如图），中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向、对称、重复排列的。;寻根问底;要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性(平)末端？;（二）“分子缝合针”——DNA连接酶;“分子手术刀”——限制性核酸内切酶;“分子手术刀”——限制性核酸内切酶;(二)“分子缝合针”——DNA连接酶;③类型：;;将外源基因送入受体细胞。;质粒：;③作为载体的必要条件：;质粒：;1）不属于质粒被选为基因载体的理由是（ ） A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA;2）有关基因工程的叙述中，正确的是（ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的载体 C、载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与目的基因连接 D、DNA连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键; 已知标记基因有抗四环素基因和抗氨苄青霉素的基因，现探讨某细菌的质粒中有无标记基因或标记基因是什么？请设计实验、预期实验结果，并得出相应的实验结论。;;思考与探究 P7;3、天然的DNA分子可以直接用做 基因工程载体吗？为什么？;1） 载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。这些供目的基因插入的限制酶的切点所处的位置，还必须是在质粒本身需要的基因片段之外，这样才不至于因目的基因的插入而失活。 2） 载体DNA必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制。 3） 载体DNA必需带有标记基因，以便重组后进行重组子的筛选。 4） 载体DNA必需是安全的，不会对受体细胞有害，或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去。 5） 载体DNA分子大小应适合，以便提取和在体外进行操作，太大就不便操作。 实际上自然存在的质粒DNA分子并不完全具备上述条件，都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。;4、DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？;什么是内含子和外现子？;什么是内含子和外现子？;知识拓展;关于内含子和外显子的说法正确的是 （ ） A .内含子和外显子在转录的过程中都能够转录成成熟的mRNAB.只有外显子能够转录成mRNA，tRNA，rRNAC.原核细胞基因中也有内含子和外显子D.由于内含子不能编码蛋白质，故它属于非编码区