第10章色谱法.ppt

课件、习题等已上网 网站地址如下：/ac/;2010年7月1日 (18周周四下);P234 11．解 ;刘 海 燕;一.发现 :;色谱分析——基于物质的物理性质进行分离和分析的方法。;样品混合物中各组分性质和结构的差异，与固定相发生作用的大小也有差异;三. 色谱法的分类 :;;液相色谱法;四. 色谱分析仪器基本流程;液相色谱仪;流动相携带进样装置引入的混合试样进入色谱柱 混合试样在色谱柱中进行分离 各组分依次进入检测器检测 检测响应信号导入计算机 得到色谱图 根据色谱图参数进行定性定量分析;五. 色谱法的特点 :;§2、色谱法基本理论;;1. 色谱流出曲线 :;; ? 用体积表示的保留值;? 相对保留值 r21;4. 色谱峰的区域宽度; 色谱曲线的意义： 色谱峰数=样品中组分的最少个数； 色谱保留值——定性依据； 色谱峰高或面积——定量依据； 色谱保留值或区域宽度——色谱柱分离效能评价指标； 色谱峰间距——固定相或流动相选择是否合适的依据。;;分离度R;理论上证明: 对于峰形对称的色谱峰;关于柱效的术语;n是柱分离效能的量度 n是常数时，Y1/2与tR 成正比 n越大，H越小，表明组分在柱中达到的分配平衡次数越多，对分离越有利，但还不能预言各组分被分离的可能性。 ; 要改善物质对的分离（提高R），即提高两相邻物质的分离度，可以采取以下措施： 提高有效塔板数 增大相对保留值r21;增大r21 是提高分离度最有效的手段。 在气相色谱中，增大r21最有效的手段是改变固定相，选择合适的固定相种类是解决分离问题的关键 在高效液相色谱中，流动相的种类和配比是改善分离最简便有效的方法。 改变柱温也可改变r21。 ;三、色谱定性定量方法;应用范围：适用于简单混合物，对该样品已有了解并具有纯物质的情况。 优点：应用简便，不需要其他仪器。 缺点：定性结果的可信度不高。 提高可信度的方法：双柱、双体系定性;2. 定量分析的方法 ;A）各种峰面积的测量方法;B）定量校正因子的测量与计算;C）计算组分含量的几种方法;适用条件 ：;适用条件 ：;;一、气相色谱仪的流程 :;1.载气系统 : ;二. 分离原理;二. 分离原理;2. 分配系数 K ：;总结 :;3.固定相的选择 :;(2)气-液色谱——担体+固定液;固定液：;固定液类型;以非极性角鲨烷的P=0 强极性??’-氧二丙腈P=100;D) 固定液的选择：;(1) 载气的选择 :;(2) 温度的选择:; 程序升温是一种色谱技术，具体操作是使柱温按预定的加热速度，随时间作线性或非线性的增加;tc=45℃;一般比柱温高30~70℃;进样选择：;四、检测器;2. 检测器检出依据;热导池池体;基本原理:;影响TCD灵敏度的因素及操作条件选择:;检测对象：适合有机物（水中、大气中痕量有机物测定） 优点：结构简单、灵敏度高（能检测ng/mL级的痕量物质）、响应快、死体积小、线性范围宽、选择性好等优点， 缺点：对无机化合物无响应，检测时要破坏样品。;结构 ：;毛细管气相色谱法;与填充柱气相色谱系统的区别;1. 高效液相色谱与气相色谱的比较;高效液相色谱法的特点;2、高效液相色谱仪;1. 高压输液系统;2．进样系统 ;3 分离系统——色谱柱 ;4．检测系统 ; 表. 液相色谱常用检测器的一般性质 ;紫外检测器;固定波长的紫外检测器 可变波长的紫外检测器 二极管阵列检测器;固定波长的紫外检测器; 可变波长的紫外检测器;光电二极管阵列检测器;差示折光检测器;§4、高效液相色谱法;差示折光检测器;§4、高效液相色谱法;§4、高效液相色谱法;3. HPLC主要分离类型及其原理 ;;§4、高效液相色谱法;反相键合相色谱法： 固定相：非极性键合相，如C8柱，C18柱流动相：极性溶剂，甲醇-水、乙腈-水等 适用范围：分离非极性、极性和离子性化合物 分离选择性：极性强的组分先洗脱出柱。;固定相 ;§4、高效液相色谱法;流动相; 流动相的强度和选择性 溶剂的极性（强度） 正相色谱：溶剂极性越强，洗脱能力越强 反相色谱：极性弱的溶剂洗脱能力强 溶剂的选择性 不同种类的溶剂，分子间的作用力不同，故选择性不同 混合溶剂（二元或多元流动相）;溶剂的种类 正相：正己烷、正庚烷、乙醚、二氯甲烷、氯仿等，己烷为主体，加入质子接受体乙醚或甲基叔丁基醚，质子给予体氯仿，偶极溶剂二氯甲烷 反相：水、甲醇、乙腈、四氢呋喃、乙醇及其混合物等，以水为主体，加入质子接受体甲醇，质子给予体乙腈，偶剂溶剂四氢呋喃。;;（2） 液固色谱法; ; 硅胶为固定相时：以弱极性的正构烷烃为主体，加入二氯甲烷等中等极性溶剂调节合适的洗脱强度。 可用水对硅胶进行减活处