弓形虫棒状体蛋白ROP16导致细胞凋亡与细胞周期阻滞机制及银杏酸杀钉螺药物作用靶向研究.pdfVIP

万方数据 英文缩略语注释英文缩写英文全称中文全称二甲基亚砜免疫共沉淀辣根过氧化物酶聚合酶链式反应光密度值透射电子显微镜三磷酸腺苷刚地弓形虫棒状体蛋白???????乙二胺甲乙酸十二烷基硫酸钠???四甲基乙二胺苯甲基磺酰氟磷酸盐缓冲液细胞计数试剂盒异硫氰酸荧光素碘化丙啶信号转导和转录激活子?质谱银杏酸??????????—??????????????????????????????????．????????????。????????????????????Ⅱ 万方数据 中文摘要第一部分弓形虫棒状体蛋白???贾孪赴?蛲龊拖赴??期阻滞机制研究随着城市的发展和人们生活水平的提高，城市和农村中宠物饲养队伍不断地扩大，同时动物身上可能携带有各种病原微生物，加上忽略饮食卫生等因素，弓形虫感染潜在危险性极度上升。刚地弓形虫??????岣疽怨?是一种专弓形虫后，通常能将这种感染传给胎儿，如果感染发生在胚胎发育早期可导致脑部疾病、眼病和先天性智障，影响胎儿的发育，导致早产、流产、畸胎和出生缺陷等先天性弓形虫病。调查显示，我国先天性出生缺陷患儿当中弓形虫的感染率达到?％，弱智和精神病患者的发病与弓形虫感染相关。弓形虫入侵人体细胞过程，棒状体蛋白发挥了极其重要的作用。迄今仅发现两种弓形虫棒状体蛋白可侵入人体细胞核内，分别是棒状体蛋白?????和??．?，前者可快速侵入人体细胞核，业已证明???捎跋烊颂逑赴??信号转导和转录激活因子???????藕糯ǖ纪揪洞佣?扇湃颂逑赴?脑鲋场⒎只?⒌蛲龅裙δ埽?ǜ玫鞍?侵入宿主细胞核后发挥的具体功能目前了解十分有限，需要进一步迸行研究。我们的假设是：?⒐?纬姘糇刺宓鞍識??可以迅速侵入人体细胞核，就可能会影响到人体细胞的正常生理功能；?⒓热还?纬娑阅韵赴?星阆蛐裕?那么侵入脑细胞的弓形虫就可能影响这些细胞的增殖、分化、凋亡等生理功能，同样???牒撕螅?捎跋煜赴?斯δ堋?、既然弓形虫感染胚胎脑细胞，那么就有可能影响早期大脑的发育。因此，我们旨在从???δ艿幕?⊙芯孔攀郑?探索???运拗飨赴??虮泶锲椎挠跋煲约坝肴颂逑嗷プ饔玫暮说鞍祝?袢?下游靶基因的信息从中寻找与生长发育相关的因子，以及???胂嗷プ饔玫?白结合后对其功能的影响，揭示弓形虫脑病形成以及弓形虫感染导致出生缺陷和本研究首先利用芯片技术检测过表达???陨窬?赴??虮泶锲椎挠?响，并结合本实验室前期质谱研究，进一步探索???肴颂逑嗷プ饔煤说鞍住???ü??蛐酒?际跫觳釹?猄??猂??稳定转染细胞株表达谱变化，筛选表达差异基因，表达谱芯片分析发现，过表达???纳窬?赶赴??性细胞内寄生原虫，呈世界范围内分布，可感染几乎所有的恒温动物。孕妇感染智障的机制。鉴定及蛋白相互作用，以探讨该蛋白导致宿主细胞凋亡的机制。主要内容及结果如下：?????????????????????? 万方数据 第二部分银杏酸杀钉螺药物作用的靶向研究细胞中???虮泶锷系鳎??基因表达下调，差异基因参与多种生物学过程包括神经系统发育，器官形成和增殖凋亡、分化等。??岷锨捌谘芯抗ぷ髦势椎姆治鼋峁?峁??秆〕鲇隦??相互作用的人体核蛋白：以免疫共沉淀双向验证???雙?之间相互结合，经激光共聚焦证实???雙?共定位于宿主细胞核。????对凋亡相关基因的影响：对上述芯片结果进行验证，在人神经母细胞瘤细胞??畇???过表达????捎胷??猼????椒?觳獾蛲?相关基因的表达，发现???梢悦飨蕴岣遬?、??????一?泶铮?种????的表达，从而促进细胞凋亡。????与??嗷プ饔煤蠖云涔δ艿挠跋欤杭觳夤?泶颮??蛋白?—??细胞凋亡和细胞周期的影响，证明???俳?涞蛲觯??鹣赴?芷?????对??约安煌?坏懔姿峄?募觳猓悍⑾諶??可以促进??鞍姿?降谋泶铮?⑻岣??磷酸化水平，降低??牧姿峄??健?结论：???肭炙拗飨赴?撕笥跋焖拗飨赴??虮泶锲住???与??存在相互作用。???种芐?猄??赴?纳?ぁ???促进?—??细胞的凋亡，引起细胞周期阻滞。弓形虫棒状体蛋白???ü齪?蛋白?????磷酸化引起?—??凋亡及细胞周期阻滞。关键词：弓形虫；蛋白质相互作用；???籶?；细胞凋亡?????⒏棺愀?????????????菪翁??系奶卣鳎?ぢ菔舴治A礁鲋郑汉?倍ぢ???????安徽、江西、湖北、湖南、广东及广西；国外尚未发见。钉螺时重要的医学贝类，染血吸虫病者约为?谌耍??亿人口受到威胁，有?个国家受影响，其中绝大多数为发展中国家，该疾病已严重危害了这些国家人民的健康和经济发展。日本血吸虫病也是我国最严重的流行病之一，以湖沼型流行区如湖南、湖北、江西、虽然我国开展大规模防治工作，使该病流行得到有效控制并取得了非凡的成就，但近年来，由于水灾、人口