第10章 合子胚培养 - 副本.pptVIP

第10章 合子胚培养;1.2 合子胚培养的概念;2 胚培养的类型;2.2 幼胚（未成熟胚）培养;（1）继续正常的胚胎发育过程，维持胚性生长，最终形成具有萌发能力的成熟胚。 进行幼胚培养时，关键是维持胚性生长（此途径为需要途径）。为了保证离体幼胚能沿着胚胎发生的途径发育，其对营养的需求较成熟胚复杂。;（2）不能维持胚性生长，迅速萌发为幼苗。 幼胚未经完成正常的胚胎发育过程而形成幼苗的现象称为“早熟萌发”(precocious germination，不需要)。 （3）形成愈伤组织。 若形成愈伤组织，愈伤组织可再分化形成植株。 ;3 合子胚培养的技术措施;3.2 胚的分离及培养;3.2.2 胚的培养;未成熟胚的培养：要求的技术和条件较高。 胚胎发育过程可分为两个时期：异养期和自养期。胚由异养转入自养是其发育的关键时期。在这两个时期之内，培养中的胚对外源营养的要求随胚龄的增加而逐渐趋向简单（p153，表9.1） 。 在人工培养基上幼胚培养难成功，利用胚乳看护培养（为什么？），可显著提高幼胚的成活率。可用同种胚乳，也可用异种胚乳（p159）。 ;4 影响胚培养的因素;幼胚培养的培养基主要有MS、B5、Nitsch、Rijven、White、Rangaswang、Norstog等。 根据Monnier(1976)的研究，在一定的培养基上，未成熟胚的生长和存活之间并不存在相关性（p161，图9.4），并设计了新的培养基（ p154～155，表9.3 ）。 另据Umbeck和Norstog(1979)报道，培养基中的NH4＋对于大麦未成熟胚的正常生长和分化是必需的。;4.1.2 碳水化合物和培养基的渗透压;蔗糖不仅是作为一种能源，而且是为了保持适当的渗透压，后者对于未成熟胚的培养来说尤为重要。 另有观点认为，胚在离体条件下的生长和分化在很大程度上并不依赖于渗透压的大小，而主要取决于某些生长调节物质的存在与否。 ;4.1.3 氨基酸和维生素;4.1.4 植物生长调节剂;4.1.5 天然有机物;4.1.6 培养基的pH;4.2 培养条件;4.2.2 光照;4.3 胚柄;使用生长调节物质，如5mg／L赤霉素能有效地取代胚柄的作用。当没有胚柄存在时，一定浓度范围的KT可促进幼胚的生长，但其作用难与赤霉素相比。 但Monnier(1978)的观点是，无胚柄的极幼龄胚所以难于培养，是由于在除掉胚柄时所引???的损伤造成的。;5 胚培养的应用;5.1.1 杂种幼胚在人工培养基上培养;如果胚的夭折发生在发育的极早期，由于人工培养基很难取代天然胚乳的作用，采用以上方法拯救杂种仍会遇到很大困难，在这种情况下，则可尝试胚乳看护培养法（p172～173）。;在以上两种方法皆难奏效的情况下，则可尝试杂种幼胚愈伤组织培养法，即先把杂种幼胚诱导成愈伤组织，经过或长或短的继代培养之后，再诱导杂种愈伤组织分化植株（p173） 。;步骤：有性杂交 杂种幼胚培养 杂种愈伤组织形成 愈伤组织增殖 茎芽分化 植株再生 例子：小麦×簇毛麦 、大麦×小麦、栽培番茄×智利番茄等 ;5.2 获得单倍体;5.3 打破种子休眠，缩短育种周期;5.4 提高种子萌发率，繁殖稀有物种;5.5 种子生活力的快速测定;复习思考题：