疫苗生产的细胞培养课件.pptVIP

疫苗生产的细胞培养和残留物;;Requirements of an Effective Vaccine; 病毒性灭活疫苗 关键点1 (病毒种子);Latent/occult viruses of safety concernin vaccine cell substrates;轮状疫苗的猪圆环病毒污染 GSK 的轮状疫苗污染PCV1，其IPV的毒种污 染PCV1的DNA，3.8×103－1.9×107 /ml MERCK D的轮状病毒疫苗存在PCV2 均为Vero细胞生产的疫苗 PCV1不引起猪或人类疾病 PCV2与猪断奶后多脏器衰歇综合征有关 来自疫苗的PCV1的222（A-G）和706（T-G） 导致172位的aa由（异亮氨酸－苏氨酸） 推测该污染PCV1可能已适应Vero细胞; baboon endogenous and Flockhouse virus; 宿主细胞残余DNA;生长因子 Growth-promoting proteins 生长因子可被生产生物制品用的细胞基质分泌； 但目前认为风险较小 生长促进作用短暂和可逆 本身不能自我复制 许多生长因子在体内较快失活 在特殊环境下，生长因子可促使细胞的肿瘤化，但细胞的肿瘤化依赖 生长因子的持续分泌和存在，至今尚未发现已用于生物制品生产的细 胞培养基质具有这种能力 干细胞 可分泌高水平的生长因子 高活性和高促生长能力 在使用干细胞制备生物制品的研究中须高度重视生长因子的风险;细胞基质—— 原代细胞 优点： 1、可以使用较简单的培养基和牛血清制备获得， 2、对大多数病毒均敏感适应，可产生细胞病变容易观察。 缺点： 1、最大的缺点是污染外源性感染因子，如病毒； 2、从不同的动物所获得的培养物对扩增病毒的敏感性和质 量可能不同； 3、非人灵长类动物很难获得； 4、获得的动物脏器所制备的细胞往往是多种类细胞，不同 批次不能保证获得的细胞的一致性。;原代细胞制备用动物 SPF (specific-pathogen-free) “closed” “封闭群” animal husbandry without any introduction of new animals fromoutside the maintained group prevents introduction of geneticallytransmittedviral elements (e.g., retroviral proviruses). Recommendations for the evaluation of animal cell cultures as substrates for the manufacture of biological medicinal products and for the characterization of cell banks，Proposed replacement of TRS 878, Annex 1，WHO 2008 动物种群在5年以上未从外部引进其他新血缘品系，是由同一血 缘??系进行随意交配，并在固定场所保存繁殖的动物群。 （实验动物质量控制）方喜业等，中国标准出版社，2008年） 以非近亲交配方式进行繁殖生产的实验动物种群,在不从外部引入 新个体的条件下,至少连续繁殖4代以上,称为一个封闭群,或叫远交群 （医学试验动物学）;细胞基质—— 二倍体细胞;细胞基质—— 二倍体细胞;二倍体细胞生产疫苗;细胞基质—— 传代细胞;美国FDA对Vero细胞用于疫苗研制的建议;美国FDA对Vero细胞用于疫苗研制的建议; 残余物与添加剂;残余细胞DNA（rcDNA）;为何对DNA表示担忧;去除或/和灭活rcDNA;Pierre Perrin* and Sylvie Morgeaux，Inactivation of DNA by b-propiolactoneBiologicals (1995) 23, 207–211;疫苗的添加剂;疫苗的添加剂;疫苗的添加剂;疫苗的添加剂