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改HPLC-2概念.ppt

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主讲教师: 袁波 沈阳药科大学药学院;经典柱色谱法分离过程;高效液相色谱法分离过程;高效液相色谱法;第三节 各类高效液相色谱法; 第一部分 液固吸附色谱法;液固吸附色谱法(LSC) liquid solid asorption chromatography;LSC的分离原理;吸附平衡与吸附系数;影响k的因素;LSC的固定相;LSC固定相分类;表征固定相性质的参数;玻璃核;LSC常用固定相——高分子多孔微球;硅胶结构和特性对色谱分离的活性影响;含水量对硅胶吸附活性影响;LSC的流动相选择;对流动相的要求:; 溶剂的强度参数ε0反映各种溶剂在吸附剂上的相对极性大小。目前,寻找一种合适流动相,对未知样品分离仍需采用尝试的方法。 首先,选用中等强度的溶剂 ;续--;LSC中使用混合溶剂的优点;LSC优点和应用;LSC的应用: 1.对于中等分子量的油溶性样品可获得满意分离 2.对于强极性或离子型样品因不可逆吸附常常不能获得满意分离 3.对不同极性取代基的化合物或异构体混合物表现出较高选择性,对同系物的分离能力较差 凡是能用TLC成功分离的化合物,都可用LSC分离。 ; 第二部分 液液分配色谱法;液-液分配色谱法(LLC) liquid liquid partition chromatography;LLC的分离原理;分配系数;LLC的分类;LLC的固定相 ;LLC的流动相;LLC的应用; 第三部分 化学键合相色谱法;化学键合相色谱法(BPC)*** Bonded Phase chromatography;化学键合相;化学键合相特点***;化学键合相的分类;键合相的制备和分类 用于制备键合相的化学反应有三种类型 (见黑板);十八烷基键合相: octadecylsilane,ODS或C18;键合相性质;3)表面覆盖率 αB:单位表面积上已键和的有机官能团的量 αOH:可反应的硅羟基的量 2.影响溶质保留行为的因素 1)键合相表面键和的炭链越长,k越大。 2)表面覆盖率越大,k越大。 表面覆盖率越小,羟基引起吸附,峰不对称,托尾。 ;使用键合相应注意的问题;ODS键合相载体;键合相制备中注意事项;反相键合相色谱法分离原理;疏水缔合反应;反相键合相色谱的流动相;流动相极性与k关系 流动相极性↑,洗脱能力↓,k↑,组分tR↑;正相键合相色谱法; ;;And For The Next Class

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