高中生物选修三专题1第一节DNA重组技术的基本工具.ppt

专题1 基因工程;基因工程的概念;1.1 DNA重组技术的基本工具;准确切割DNA的工具（“分子手术刀”） ——限制性内切酶 DNA片段的连接工具（“分子缝合针”） ——DNA连接酶 基因转移工具（“分子运输车”） ——载体;原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，但是，在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，以保证自身的安全。;限制性核酸内切酶——“分子手术刀”;限制性内切酶;黏性末端和平末端;含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别序列，或者通过甲基化作用使限制酶不能将其切开。 ;DNA连接酶——“分子缝合针”;DNA连接酶——“分子缝合针”;不是一回事。 相同点：形成磷酸二酯键。 但是：1）DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 2） DNA聚合酶需要以DNA单链为模板；而DNA连接酶不需要模板。;基因的载体——“分子运输车”;质粒;2和7能连接形成…ACGT… ????????????? …TGCA…； 4和8能连接形成…GAATTC… ???????????? …CTTAAG…； 3和6能连接形成…GCGC… ???????????? …CGCG…； 1和5能连接形成…CTGCAG… ???????????? …GACGTC…。;1、关于限制酶的说法中，正确的是（??? ） A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列 B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外 源DNA D．限制酶只存在于原核生物中;2 不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA;3、作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件及理由是( ???) A、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因 B、具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件 D、能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选