3.暗视场和相差显微镜.pptVIP

暗视场显微镜及相差 显微镜的使用;实验目的;实验内容;一 暗视场显微镜;图1 暗视野聚光器工作原理;（二） 结构特点;（三 ）使用方法 ;（四）应用价值及注意事项; 观察原生动物的结构，细胞器，细胞质中超微质点的运动，存在方式，观察植物细胞器，细胞质运动。;二 相差显微镜; 相位: 是指在某一时间上，光的波动所能达到的位置 . 相差: 是指相同波长的光线经过折射率不同的介质，其相位发生变化而产生的位差，相差一般不为肉眼所分辨，而相位的变化是由光程的差别造成的。 光程: 是指媒质的折射率和媒质厚度的乘积。 衍射: 光在不均一的媒质中传播，其方向发生弯曲变化，形成衍射光，此为衍射现象。衍射光和直射光比较有1/4 的相位差，振幅亦弱 。 干涉: 直射光和衍射光相遇会发生迭加现象造成振幅的变化，或明或暗。;图2 光波通过不同介质时产生的相位差;图3 直射光及衍射光的产生与波动;图4 相差显微镜的光路图;（二 ） 相差显微镜的结构特 1. 用环状光阑代替可变光阑：把直射光所成的像从衍射旁像中分出来。 2. 用相差物镜(内含相板)代替普通物镜 相板结构 共轭面:环状，通过直射光 补偿面:非环状，通过衍射光 相板作用:将直射光和衍射光分别加以相位调整 及强度削弱 . 相板类型:明相差或负相差 ,暗相差或 正相差 . 3. 用中心望远镜合轴调中 4. 光源和滤色镜：强光低热和绿色滤色镜;图5 相板结构示意图;相差装置的安装 相差物镜的调换安装 转盘聚光器的调换安装 把绿色滤色镜放入镜座的滤色镜架上 聚光器的调中 相板圆环与环状光阑圆 ,薄则环的合轴调中 相差物镜与环状光阑的匹配 把CT放入目镜筒 明环和暗环的聚焦 明环和暗环的调中重叠 回装观察目镜 ;图6 相差聚光器及合轴望远镜;图7 光环与相板的合轴过程 a 未调整状态 b 近调整状态 c 正常态; 字母 反差 应 用 P 正 观察细胞和细胞核的内部结构 N 负 观察微小的物体 ,如孢子 ,鞭毛和活的样品等 H 高 当样品反差较低时 L 低 当样品反差较高时 M 中 当样品反差为中等时 ;图8 光的干涉及明暗相差形成的图解;（五）观察: 培养的草履虫装片及其它原生动物 鸭趾草下表皮（质点颤动） 鸭趾草雄蕊毛（胞质环流） 注意事项: 制片愈薄愈好（20微米以下） 必须加盖片，否则圆环和亮环不重合，反差不好。 玻片无伤，均匀，平整，以免亮环发生歪斜，制片厚度不超过 1.0 mm ，厚则亮环大，薄则亮环小。 如果染色必须浅，而且是淡染。;思考题;